驗地點:中科院生物物理所生物大分子國家重點實驗室
用戶:常文瑞組
實驗方法
1、破碎前的準備:
0.1g菌體(本實驗以0.1g菌體為例);
直徑3號陶瓷珠;
研磨機(選用品牌上海凈信科技TS-24);
預處理好的2ML研磨管;
模塊冷凍。
2、研磨:
0.1g菌體,5000r/min離心1 min后去上清,加入等體積的玻璃珠,加入0.5ML PBS溶液,放入預先冷凍好的模塊中,放入上海凈信科技的研磨機中,調整頻率為60Hz,震蕩時間60s.
注:破菌效率隨著液體體積的增加而增加,液體體積達到100ul時開始達到zui大破菌效率。
附:陶瓷珠回收,以下是方法:
1、將含陶瓷珠的EP管,放置在大燒杯中,用自來水中浸泡2-3天。
2、用鑷子將陶瓷珠和細胞碎片等全部抖落到燒杯中。靜置待玻璃珠沉淀后,輕輕將上面懸浮的細胞碎片倒掉,在加水重懸陶瓷珠。
3、重復步驟2,4-5次直到所有的細胞碎片都去除干凈。
4、加入適量的濃硝酸(將陶瓷珠全部覆蓋即可),浸泡過夜。
5、去離子水洗三次,置烘箱中干燥即可。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。