美國蘭博柱后衍生-液相色譜法測定植物油中的AFB1的含量

AFB₁是AF霉菌的代謝產(chǎn)物，廣泛存在于霉變的糧食及由糧食制得的食品和飲料中。AFB有許多種，其中B₁的致癌性zui強，而且化學(xué)結(jié)構(gòu)非常穩(wěn)定，加熱到268 ～ 269℃才分解，普通的食物處理方法不會減少B1的含量，所以AFB1一旦進入人類的食物鏈，會對人類身體健康造成極大的危害。1993 年，AFB1被世界衛(wèi)生組織( WHO) 的癌癥研究機構(gòu)劃定為Ⅰ類致癌物質(zhì)，也是目前食用植物油食品中安全性檢查主要項目之一。

目前AFB1檢測所用的薄層法測定AFB1的方法不是專一性的，因有的樣品中其他物質(zhì)亦可產(chǎn)生類似AFB1的藍紫色熒光點，對測定產(chǎn)生干擾，也因此造成樣品處理繁瑣( 要進行樣品提取、凈化) ，分析所需時間長，而且只能測定zui*，不能測定樣品中AFB1的含量。如干擾物的Ｒf 值與AFB1一致，很易造成測定誤差，所以這種測定方法只作化學(xué)分析法的一般佐證法。

酶標法雖然在使用上比較快速，但與薄層法一樣，均屬于一種半定量的分析方法，重復(fù)性差，試劑壽命短，需低溫保存，假陽性概率較高，需要配置專門的酶標儀，在基層檢測難度較大，對樣品要求高，對某些含鹽量高、脂肪含量高的樣品需要進行額外的適當?shù)奶幚?，該方法通常可以作為初篩，對陽性結(jié)果需進行進一步的確正檢測。

柱前衍生液相色譜法因其方法上的局限性其衍生的信號強弱會因手動操作的強弱和時間等條件的改變而改變，這樣給定量帶來諸多的誤差。上述這些方法都在樣品處理上較復(fù)雜，靈敏度差，回收率不理想。

天津蘭博應(yīng)用實驗室采用柱后衍生液相色譜法，得到了很好的結(jié)果。

    Lanbo Series6500液相色譜儀            PCR3柱后衍生系統(tǒng)

儀器:

美國蘭博液相色譜儀，配熒光檢測器；

美國蘭博柱后衍生儀PCR3；渦旋混合振蕩器；超聲波清洗器；電子天平。

柱后衍生液相色譜法

色譜條件：

色譜柱: Zorbax SB C18( 250 mm ×4.6 mm，5 μm) ;

流動相: 甲醇-水( 45 ∶ 55) ; 流速: 0.8 ml/min;

柱溫: 35 ℃;

檢測器: 熒光檢測器。激發(fā)波長( λex) :360 nm，發(fā)射波長( λem) : 420 nm;

進樣量: 20 μl;

柱后衍生化系統(tǒng):

衍生溶液: 0.05% 碘溶液;

衍生溶液流速: 0.2 m l/min;

柱后衍生反應(yīng)器溫度: 70℃，反應(yīng)時間: 1 min。

利用柱后衍生系統(tǒng)和液相色譜相結(jié)合，對食用油中的AFB1進行檢測，通過對色譜條件和樣品處理方法的摸索，得到靈敏度、回收率、精密度較理想的測試方法，且檢測所需時間短，分辨率高，還可對樣品同時進行定性、定量測定，利于大量批次樣品檢測，有條件的實驗可作為常規(guī)手段推廣應(yīng)用。