ELISA檢測體系可謂是免疫學反響應用到科研出產(chǎn)中更為廣泛更為靈敏的技術手段。但是在新老手操作過程中老是會泛起或大或小的題目，比如說花板，假陽性，全顯色，悉數(shù)顯色，顯色比空缺還低。研域生物研究人員一直在尋求讓ELISA試劑盒實，ELISA體系更安穩(wěn)的辦法。讓我們的客戶實驗愈加便利，削減更多操作中遇到的困擾。
     

包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這到你做出的抗體可不能夠被其辨認，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴厲正告我一定要在冰浴下緩慢消融就是這個道理。封閉就是讓很多不相關的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑，然后排斥ELISA后的步驟中攪擾物質(zhì)的再吸附。但有時由于實驗的需求，包被原的特殊性也可能選用中性的緩沖溶液來包。

常用封閉劑有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較價廉，能夠高濃度運用（5%－10％）；還有一些稀有用到的各種動物血清（首要為了掃除類似蛋白攪擾）和酪蛋白等等。具體的實驗還要有鞏固的理論外也要實踐，看一下*可不能夠應用到自己實驗當中去。但*選用什么，要依據(jù)實驗具體來實踐。應留心以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間的效果，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。還有有的包被原可能不是蛋白，對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事前對其改造再加以包被，親和素生物素:先親和素先包被載體，參加生物素化的DNA，這種包被辦法均勻、結(jié)實，已擴展應用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。常用的包被液除了方才說到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
   

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