一、novoprotein DNA Marker特點:
- 每個條帶均為單獨定量制備
- 可以用于 DNA段大小和濃度的判斷
- 帶型清晰明亮、條帶大小準確,覆蓋范圍廣(100bp-10kb)
- 明暗條帶優(yōu)化比例,條帶更美觀
- 內(nèi)含上樣緩沖液和指示染料可直接上樣、快捷方便
- 添加了特定穩(wěn)定劑,穩(wěn)定性高,于-20℃可保存兩年以上
- 適用于 TAE 和 TBE緩沖體系
- 可以任選條帶定制DIY DNA Marker
- 價格優(yōu)勢明顯
二、如何選擇novoprotein DNA Marker
如圖為novoprotein 在售的18種DNA Marker,可以根據(jù)您的目的片段大小,選擇附近條帶較密的marker,這樣對目標片段大小的估計較準確。兩個不同目的帶同時電泳時,盡量選擇同時可以標定兩個目的片段的marker。如果您的實驗有特殊條帶需求,我們還可以為您提供DIY DNA Marker定制服務(wù)。
(DNA Marker電泳圖)
三、novoprotein DNA Marker使用方法及注意事項
使用注意事項:
- 建議選擇合適濃度的瓊脂糖凝膠(DNA段越短膠濃度越大:<0.5k,膠濃度1.2-1.5%;>10kb濃度,0.3-0.7%;0.5<DNA<10kb,膠濃度為0.8-1.0%)
- DNA Marker使用前*化凍并混合均勻
- 取5 μl直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中(約每1 mm點樣孔寬度加1 μl)進行電泳
- 低電壓下不受場強影響,分離效果好。一般電壓4-10v/cm,大片段電泳時注意控制電壓。
- 及時更換電泳緩沖液
保存注意事項:
4℃保存3個月以上,-20℃保存2年。(如客戶電泳使用頻繁可于室溫隨時使用,但我們推薦客戶于4℃存放)
DNA Marker 加樣時盡量使用新槍頭,避免核酸酶污染
四、DNA Marker使用問題解析
- 條帶模糊
原因 | 解決方案 |
凝膠濃度不合適 | 根據(jù)片段長短選擇合適的凝膠濃度 |
電泳緩沖液緩沖能力差 | 反復(fù)使用后緩沖能力下降需及時更換 |
電壓過高時間過長 | 電壓不應(yīng)該超過20V/cm,電泳溫度應(yīng)該低于30℃ |
上樣量過多 | 減少上樣量以marker條帶為準條帶更清晰 |
電泳膠質(zhì)量不好 | 選擇好膠粉充分溶膠 |
Marker降解 | 防止核酸酶污染,確保保存溫度和時間 |
亮度不夠或不均一
原因 | 解決方案 |
上樣量少 | 可適度增加上樣量 |
EB濃度低 | 按照要求加入EB,一般為終濃度0.5-1ug/ml |
凝膠不均勻,膠質(zhì)過厚 | 充分煮膠至透明無雜質(zhì)和絲狀物,倒膠均勻適量 |
電泳膠亮度不均一 | 電泳時間過長時,瓊脂糖膠前部EB會遷移至膠后部,造成前后DNA染色亮度不一,可在電泳開始前,在瓊脂糖膠前部,靠近電泳槽陽極附近加入少量EB并混勻。 |
條帶污染
原因 | 解決方案 |
污染核酸外切酶至DNA降解 | 使用滅菌的槍頭,及時蓋緊管蓋 |
點樣時污染 | 加樣時及時更換槍頭 |
五、Marker條帶比較分析
對市場上熱銷DNA Ladder 2000同類型產(chǎn)品調(diào)查對比見下表:
公司名稱 | 次數(shù) | 目錄價 | 定量條帶(標稱) | 普通條帶(標稱) | 備注 |
Takara | 40 | 85 | 30ng/ul | 10ng/ul | 5ul電泳,亮帶150ng,其余50ng |
康為世紀 | 50 | 48 | 30ng/ul | 10ng/ul | 5ul電泳,亮帶150ng,其余50ng |
東盛 | 60 | 90 | 30ng/ul | 15ng/ul | 5ul電泳,亮帶150ng,其余75ng |
SinoBio | 50 | 70 | 20ng/ul | 10ng/ul | 5ul電泳,亮帶100ng,其余50ng |
全式金 | 50 | 70 | 20ng/ul | 10ng/ul | 5ul電泳,亮帶100ng,其余50ng |
天根 | 50 | 90 | 17ng/ul | 8ng/ul | 6ul電泳,亮帶100ng,其余50ng |
由表中可以看出,我們的marker濃度在市場上位于中等水平,從價格來看也比較有優(yōu)勢,且我們的活動力度較大。(目前marker產(chǎn)品,買二送二)
為了取得美觀的DNA Marker電泳分布圖譜,我們在產(chǎn)品制備過程小幅度調(diào)整了非定量條帶的濃度,結(jié)果使定量條帶更醒目,相對其他條帶更易區(qū)分。
Marker條帶電泳圖譜比較
- Novoprotein新產(chǎn)品DNA Ladder 2000 plus II
- 2、Novoprotein DNA Ladder 2000
- 3、T 1公司同類型 Marker DL2000
- 4、T 2公司同類型 Marker D2000
(1%瓊脂糖膠,2ul電泳可見novoprotein DNA marker條帶清楚,帶型美觀。)
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。