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            進(jìn)口elisa試劑盒技術(shù)和WESTERN的不同?

            來源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司   2018年08月17日 15:59  

                 進(jìn)口elisa試劑盒Western Blot與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測(cè)物是蛋白質(zhì),“探針”是抗體,“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。

            免疫學(xué)三大工具,免疫組化、Western、ELISA,分別用于定位,定性和定量,各有各的功能。
             Western用于測(cè)分子量,ELISA用于測(cè)濃度。
                他們?cè)跍y(cè)量前都要一個(gè)尺子(標(biāo)準(zhǔn)),但Western的尺子上標(biāo)的是分子量(KD),ELISA的尺子上標(biāo)的是濃度。
               Western用的是蛋白MARKER(已知大小的幾條蛋白),與蛋白一起電泳(不同泳道),實(shí)驗(yàn)結(jié)束后知道目標(biāo)蛋白的大小。
                 進(jìn)口elisa試劑盒用的是標(biāo)準(zhǔn)品(已知濃度的蛋白,自己稀釋成不同濃度),與未知相本一起反應(yīng)(不同孔),實(shí)驗(yàn)結(jié)束后判斷目標(biāo)蛋白的濃度。
                至于他們的后期原理,都是用抗體與目標(biāo)蛋白反應(yīng),再加一個(gè)HRP標(biāo)記的二抗,HRP可以讓DAB顯色(Western是DAB或者ECL發(fā)光,在膜上顯色,而ELISA用TMB顯色,顏色在孔里面,)
               當(dāng)然,實(shí)際操作也沒這么簡(jiǎn)單,但后期利用的原理是相當(dāng)?shù)摹?/p>

             KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體 SSDD/Steroid sulfatase

             KT3 tag抗體 SSB/La

             k輕鏈抗體 SSA/52KDa Ro

             Lgr5/GPR49抗體 srGAP3

             LIX1抗體 SRG11/Spata17

             Lpin1 抗體 SREBP-2

             Lpin1 抗體 SRF/SAP2/MCM1

             LRIG1抗體 SREBP-1

             LRIG2抗體 SRC

             LRIG3抗體 SPY

             LY75抗體 Spindlin 1

             L-瓜氨酸抗體 SPHK2
            進(jìn)口elisa試劑盒

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