樣本的收集跟保存直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn))以其靈敏度較高、特異性好的特點(diǎn)已廣泛用于科研實(shí)驗(yàn)及臨床,越來(lái)越多科研單位選擇用ELISA實(shí)驗(yàn)方法完成研究課題。的試劑、好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件,但樣本的收集及保存操作不當(dāng)也會(huì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果。樣本的收集跟保存聽(tīng)上去貌似很簡(jiǎn)單,但不乏有許多科研工作者因?yàn)闃颖镜氖占4鏇](méi)做好而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
下面針對(duì)樣本收集及保存紀(jì)寧生物提幾點(diǎn)建議:
1.嚴(yán)重溶血,以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽(yáng)性;
2.混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng):
3.標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;
4.采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染:塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
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