各位大蝦,我做了大鼠組織的TNF-α免疫組化,是取材后送到醫(yī)院病理科出錢(qián)代做的,現(xiàn)HE和免疫組化片子已經(jīng)做好,我才意識(shí)到?jīng)]有陽(yáng)性和陰性對(duì)照,請(qǐng)問(wèn)這兩種對(duì)照該怎么弄,是我自己想辦法還是該病理科負(fù)責(zé)給我設(shè)立?需要我自己再買(mǎi)相應(yīng)的試劑嗎?以前沒(méi)有做過(guò),所以一頭霧水,請(qǐng)不吝賜教,多謝!
免疫組化染色中的對(duì)照片的設(shè)置非常重要,它是判斷您的染色是否成功的關(guān)鍵依據(jù),而且也是檢測(cè)每一個(gè)抗體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),常設(shè)的對(duì)照如下:自身對(duì)照、陰性對(duì)照(空白對(duì)照、替代對(duì)照、抑制對(duì)照、 吸收實(shí)驗(yàn)對(duì)照)、陽(yáng)性對(duì)照。
A、自身對(duì)照:在同一切片上與檢測(cè)的目的物對(duì)照比較。如Actin、CD34在正常組織中的血管壁肌層應(yīng)為陽(yáng)性,Vimentin可以間質(zhì)細(xì)胞,Desmin以血管壁及肌束為對(duì)照,S-100以小神經(jīng)末為對(duì)照等,如果應(yīng)為陽(yáng)性的組織是陽(yáng)性,則技術(shù)操作正確,如為陰性,則表明技術(shù)或免疫試劑質(zhì)量有問(wèn)題。
B、空白對(duì)照:用緩沖液替代一抗。
C、替代對(duì)照:用非免疫血清替代一抗。
D、抑制對(duì)照:使用與一抗相同的非標(biāo)記抗體稀釋特異性一抗,適于直接法。
E、吸收實(shí)驗(yàn)對(duì)照:已知抗原與相應(yīng)的抗體混合,發(fā)生結(jié)合沉淀,再用此沉淀抗體復(fù)合物進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn),結(jié)果為陰性。
F、陽(yáng)性對(duì)照:用以含有靶抗原的切片進(jìn)行對(duì)照。
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