進口elisa試劑盒含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,ELISA試劑盒靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附性能。
假如測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則以為回收率為98%。因為其試劑不亂、易保留,操縱簡便,結(jié)果判定較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢修的各領(lǐng)域中。即檢出值與實際值的比值,ELISA試劑盒回收率就是用于檢測的試劑盒回收率,對于定量檢測來說,主要仍是一個正確度的驗證。
例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。ELISA試劑盒當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。
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