瘦肉精：一類動物用藥的統(tǒng)稱，任何能夠促進瘦肉生長、抑制動物脂肪生長的物質(zhì)都可以叫做“瘦肉精”。 目前，能夠?qū)崿F(xiàn)這種功能的物質(zhì)是一類叫做β-受體激動劑的藥物，將其混入豬飼料進行飼養(yǎng)，能促進豬的生長速度、提高瘦肉率，同時使肉色鮮紅，賣相更好。與傳統(tǒng)瘦肉精yan酸克倫特羅同屬“腎上腺受體激動劑”的萊克多巴胺等同類藥物同樣也能提高豬的瘦肉率。

yan酸克倫特羅的檢測方法主要有酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、膠體金免疫層析法、液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法及液質(zhì)聯(lián)用法。國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.192-2003 動物性食品中克倫特羅殘留量的測定中規(guī)定方法為氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)、液相色譜法、酶聯(lián)免疫法，其方法檢出限均為0.5μg/kg。SN/T 1924—2007 進出口動物源食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測方法采用LC-MS-MS法，該方法因具有高靈敏度等優(yōu)點被普遍使用。本文使用UPLC/Xevo TQ-S對豬尿液中的21種β-受體激動劑進行了分析。

QUANPEDIA是沃特世*的一種可擴展和可搜索的數(shù)據(jù)庫，提供LC-MS-MS定量方法信息，目前數(shù)據(jù)庫已有超過1200種化合物，包括色譜方法、質(zhì)譜方法、定量方法等，可以自由選擇其中的任意化合物或化合物種類自動形成所需的方法，不需要再進行手動方法開發(fā)過程。

樣品制備：

樣品制備參照GB/T 22286-2008《動源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定》進行。

1.量取2.0 mL豬尿液樣品，加入8 mL 0.2M的pH 5.2的乙酸鈉緩沖液，充分混勻。

2.加入50 Lβ-Glucuronidase/aryl sulfatase混勻，于37 °C水浴水解過夜。

3.水解液振蕩15min，在5000r/min條件下離心分離10min后，取4mL上清液中添加100 μL 10 ng/mL的內(nèi)標(biāo)溶液混勻, 加入5 mL 0.1M高氯酸混合均勻，并調(diào)節(jié)溶液pH值到1±0.3。以5000 r/mim條件下離心分離10 min后，移取上清液并用10M的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到11。

4.加入10 mL飽和氯化鈉溶液和10 mL異丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液，離心分離后取有機相，在40℃水浴下用氮氣將其吹干。

5.提取殘渣中加入5mL 0.2M乙酸鈉緩沖液(pH 5.2)，超聲混勻溶解殘渣。

6.樣品凈化(如下圖所示)，使用Oasis MCX(3cc/60mg)小柱。

7.凈化后的洗脫液用氮氣吹干，用流動相溶解定容至1.0mL，過0.22μm濾膜，待進樣分析。

固相提取凈化過程Oasis MCX(3 cc/60mg)：

結(jié)果與討論：

本方法采用一次進樣同時監(jiān)測豬尿液樣品中的21種β-受體激動劑進行檢測，在靈敏度、分離度等方面均獲得滿意的結(jié)果。

與常規(guī)串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀不同的是，Xevo TQ-S在提供好的定量數(shù)據(jù)的同時，還可以提供高質(zhì)量的光譜MS/MS信息。對豬尿液中含0.5ng/mL的受體激動劑樣品，啟用PICs(子離子確認(rèn)掃描)功能，可在不影響MRM定量的同時得到各化合物子離子掃描圖，與標(biāo)樣子離子圖進行匹配，對樣品中陽性結(jié)果定性起到幫助判斷的作用。

結(jié)論：

本方法采用多離子反應(yīng)監(jiān)測(MRM)方式對21種β-受體激動劑進行檢測，具有快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、分析周期短、適用范圍廣等優(yōu)點，適用于各類動物組織或動物源性食品等的測定。

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