小鼠ELISA試劑盒的相關(guān)知識(shí)普及
為了成功的操作小鼠ELISA試劑盒,需要在確立穩(wěn)健的多色配色方案,確定正確對(duì)照和進(jìn)行重復(fù)性好的分析上花費(fèi)大量的時(shí)間和精力。除了資源共享實(shí)驗(yàn)室和核心設(shè)備花費(fèi)大量的時(shí)間在儀器質(zhì)量控制上,研究人員也會(huì)把質(zhì)量控制結(jié)合進(jìn)他們的實(shí)驗(yàn)中。質(zhì)量控制管能實(shí)現(xiàn)確保實(shí)驗(yàn)之間的PMT電壓一致,能確保實(shí)驗(yàn)正確進(jìn)行并且能確保設(shè)門(mén)策略具有說(shuō)服力。
洗板時(shí)容易造成誤差:因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng);
小鼠ELISA試劑盒的顯色問(wèn)題:使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況;
試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍;
加樣中可能遇到的問(wèn)題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理;
讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈;
終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒;
一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類(lèi)試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量;
按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑;
準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等;
標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存。
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