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            活化素A(ACVA)ELISA試劑盒操作步驟

            來源:上海研生實業(yè)有限公司   2019年06月05日 14:35  

            活化素A(ACVA)ELISA試劑盒操作步驟

            1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

            2.  設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

            3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

            4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

            5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

            6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

            7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

            實驗結(jié)果計算

            以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

            試劑盒性能

            1.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

            2.  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

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