Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用手冊(cè)

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Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液介紹
1. 是一種通用型的細(xì)胞凍存液，可用于凍存人和各種動(dòng)物細(xì)胞株；
2. *凍存液配方，即開(kāi)即用，方便快捷；
3. 非程序降溫，-80℃低溫冰箱凍存長(zhǎng)達(dá)5年；
4. 特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力；
5. 不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全；

6. 可孔板（細(xì)胞培養(yǎng)板）凍存，可用于雜交瘤細(xì)胞的凍存液。

Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件
儲(chǔ)存于4℃或-20℃。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起，為期三年。
3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí)，盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低，推薦將產(chǎn)品分裝成小管后，再存放于-20℃冰箱凍存。

Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法

1. 凍存方法
選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
1）按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。
2）按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。（參考：5×105至5×106 cells/ml）。
3）取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min）。移去離心管中的上清液。
4）加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細(xì)胞混合液。
5）將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示*的冷凍保存管中。
6）直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱，長(zhǎng)期冷凍保存。

2. 復(fù)蘇方法
1）從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。
2）待凍存管中細(xì)胞混合液*融化后，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。
3）離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min），移去上清液。
4）清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液。
5）加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。
6）鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。