當(dāng)實驗新手使用血清時遇到這些問題應(yīng)“淡定”處理:
1. 怎樣去除沉淀物?
技術(shù)解答:若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。
我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
2. 我的FBS部分解凍,該怎么辦?
技術(shù)解答:讓血清*解凍,輕輕旋轉(zhuǎn)血清瓶, 然后重新冷凍血清。血清質(zhì)量不會受到影響。
3. 怎樣熱滅活血清?
技術(shù)解答:血清熱滅活是在水浴56度,保持30分鐘, 水位應(yīng)該高于血清水位。在熱滅活過程中,溫度的調(diào)節(jié),通過監(jiān)控含同樣體積的水的參照瓶里的水溫進(jìn)行調(diào)節(jié)。在熱滅活過程必須旋轉(zhuǎn)瓶子每5 分鐘混合一次,確保受熱均勻。使用的溫度計必須經(jīng)過校準(zhǔn)!
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活血清。
如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁,污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化。
那么黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能是因為:
1、配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長。
2、血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果。
3、培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
4、細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘骸。
5、配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn)。
好的血清才能讓實驗更加成功,結(jié)果更加,所以選擇一個好的血清對您的實驗來說是非常有必要的。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。