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高效液相色譜柱由高壓液體泵分離系統(tǒng)、檢測器及液相色譜柱（含柱溫控制系統(tǒng)）等三部分組成。其中液相色譜柱是液相色譜工作的關鍵，液相色譜柱的性能直接關系到分離分析的準確性與適用性。
高效液相色譜柱峰形后拖尾是什么原因造成的?
1.柱物理損壞
色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源。解決方法就是更換新柱。
2.柱內(nèi)填料污染
流動相和樣品中的雜質(zhì)是色譜柱主要污染源。
流動相所用的各種溶劑至少是分析純，盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水要是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45um溶劑微孔過濾(器)過濾，除去可能存在的微粒。流動相建議現(xiàn)用現(xiàn)配，對于含鹽的溶液尤其注意長置會產(chǎn)生細菌或出現(xiàn)沉淀。此外還得保證儲存流動相的容器清潔。
復雜樣品可選用0.45um溶劑微孔過濾(器)或樣品預處理柱對樣品進行預處理，確保樣品中不含微粒雜質(zhì)。若樣品不便處理，要使用保護柱。柱內(nèi)填料污染時，可將柱頭螺絲卸下，用工具挖出柱內(nèi)前段被污染填料，再以相同的填料重新填入，修復。或以能溶解污染物的流動相按色譜柱使用的相反方向，沖洗色譜柱(約20至30倍柱體積，或視具體情況而定；另外，此時不能接檢測器)，將污染物沖出色譜柱，再按色譜柱標明的使用方向使用。
3.柱進口處有異物
當斷定是柱進口處有異物時，可將柱頭螺絲卸下，取出濾帽并將其置于20%硝酸溶液中，用超聲波清洗約20分鐘，再置于超純水中，并用超聲波清洗約10分鐘，重新裝入色譜柱內(nèi)即可。
4.樣品濃度過高致使柱超載
樣品在柱上超載能引起峰展寬，拖尾(或伸舌)。
適當減小進樣量或樣品濃度(需要時，可提高檢測器靈敏度)直至峰形和保留時間不再改變，便可消除這種不良影響。減小進樣量還能改善其分離度。正常情況下，樣品中每種化合物在150×4.6mm柱中進樣量保持在3～50ug范圍內(nèi)，不會引起明顯超載。
5.樣品溶劑不對
選擇合適的樣品溶劑，以排除不必要的干擾。要選用流動相溶解樣品。
6.柱外效應
柱外效應(即進樣閥、色譜柱及檢測器間的管路過長、直徑過粗、管路接頭不匹配、有死體積)是影響色譜柱柱效的主要因素之一。所以在可能的條件下，色譜柱的兩端連接管路要盡可能短，連接管內(nèi)徑盡可能細小，切口務必平整光滑，盡可能的減小死體積，以防止因樣品擴散造成不能反映色譜柱真實柱效等情況發(fā)生。
7.緩沖不足或不合適
在緩沖不好或離子強度過低的分離中，也會出現(xiàn)保留時間重現(xiàn)性差和峰形拖尾。增加緩沖濃度(與樣品大小相匹配)能改善此情況。
8.硅醇基團作用
仔細分析色譜柱內(nèi)填料表面性質(zhì)可知：反相色譜柱填料的表面大約被鍵合相覆蓋了一半，其余的就是未被鍵合的硅醇基團。所謂的保留是指樣品分子與鍵合相相互作用的結(jié)果。但是，酸性或堿性化合物與硅膠表面殘存的硅醇基團或金屬雜質(zhì)之間相互作用而引起雙重保留機理，因此，發(fā)生了峰形拖尾。
為了減小峰形拖尾，通常可在流動相加入25mM三乙胺(抑制劑)。三乙胺能與硅醇基團發(fā)生強烈的相互作用，從而降低或阻斷樣品分子與硅醇基團的作用，以保證保留機理正常進行，并大大緩解了峰形拖尾。使用長鏈的硅醇基抑制劑，雖起效較慢，但持續(xù)力較三乙胺長。因為抑制劑分子中除了胺基與硅醇基團發(fā)生極性作用外，大分子中非極性部分與固定相也會發(fā)生反相作用而產(chǎn)生保留現(xiàn)象。如果將抑制劑加至樣品中，效果會顯著。
9.柱內(nèi)金屬污染
柱內(nèi)金屬污染(Fe，Ni等)可引起某引些化合物峰形拖尾。金屬可由填料本身帶進，也可由腐蝕性流動相緩慢溶解柱進口的金屬濾片，隨流動相沉積到柱填料中。例如C18柱填料被金屬污染后，造成酸性/堿性樣品拖尾，可用堿洗/酸洗后再鍵合的填料，得到的峰是尖銳且對稱的。
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