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隨著質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展,質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域也越來越廣。由于質(zhì)譜分析具有靈敏度高，樣品用量少，分析速度快，分離和鑒定同時(shí)進(jìn)行等優(yōu)點(diǎn)，因此，質(zhì)譜技術(shù)廣泛的應(yīng)用于化學(xué)，化工，環(huán)境，能源，醫(yī)藥，運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)，刑事科學(xué)技術(shù)，生命科學(xué)，材料科學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域。
在質(zhì)譜分析中，同位素內(nèi)標(biāo)法是以穩(wěn)定同位素標(biāo)記化合物作為內(nèi)標(biāo)，利用待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)的響應(yīng)豐度比值(峰面積比)進(jìn)行線性回歸，通過對(duì)同位素豐度的準(zhǔn)確質(zhì)譜測(cè)量和對(duì)加入的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)確稱量，做到對(duì)待測(cè)物的定量測(cè)定。該技術(shù)不需要對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定量分離、能有效消除基質(zhì)干擾、檢測(cè)靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，已在食品、環(huán)境、臨床、藥物等分析領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。
我們先看下同位素內(nèi)標(biāo)是如何消除基質(zhì)效應(yīng)的？
首先我們來看下電噴霧電離(ESI)的原理
01第一步，溶液在噴霧毛細(xì)管形成自由的帶電霧滴。
02第二步，通過溶劑蒸發(fā)和霧滴分裂使帶電霧滴變小，這一過程反復(fù)進(jìn)行，直至生成很小的帶電霧滴。
03第三步，當(dāng)靜電排斥力大于引力時(shí)，很小的帶電霧滴釋放出分析物離子。
很明顯地，如果有任何干擾物質(zhì)影響了分析物在液滴表面的離子化過程或者形成了競(jìng)爭(zhēng)，那么就會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度，這種就是基質(zhì)效應(yīng)。也有人認(rèn)為基質(zhì)效應(yīng)是由于干擾物和分析物共洗脫所致。這些干擾物隨樣品的不同而不同，比如有鹽、脂肪、表面活性劑和其他極性物質(zhì)等。
基質(zhì)效應(yīng)不能通過傳統(tǒng)的內(nèi)標(biāo)來消除，這是因?yàn)閭鹘y(tǒng)的內(nèi)標(biāo)和分析物因?yàn)闃悠坊|(zhì)不同，導(dǎo)致分析物和內(nèi)標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果大不相同，增加了檢測(cè)結(jié)果的不確定性。
但是可以通過在樣品中加入同位素內(nèi)標(biāo)法來消除基質(zhì)效應(yīng)，同位素內(nèi)標(biāo)和分析物結(jié)構(gòu)相似，因此和分析物在樣品基質(zhì)中的表現(xiàn)一樣。因此在多分析物檢測(cè)時(shí)，為每個(gè)分析物挑選合適的同位素內(nèi)標(biāo)可以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
那么在檢測(cè)中，我們應(yīng)該如何挑選同位素內(nèi)標(biāo)？
1應(yīng)盡量選擇同位素豐度>98%以上的標(biāo)準(zhǔn)品。
2因?yàn)殡a(chǎn)品容易和液相流動(dòng)相溶劑中的活潑氫發(fā)生交換, 為了提高質(zhì)譜檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確率，建議液相盡量選擇非氘代的同位素標(biāo)記產(chǎn)品，如13C，15N等。
3如果選擇氘代產(chǎn)品作為內(nèi)標(biāo)，需選擇質(zhì)量差大于3(D3以上)的產(chǎn)品。
4同位素取代的位置也非常重要，根據(jù)檢測(cè)方法選擇合適的同位素
相關(guān)產(chǎn)品
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