HPLC高效液相色譜儀是什么?有哪些結(jié)構(gòu)及功能?
HPLC高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等,它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
HPLC高效液相色譜儀的儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),因此在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
HPLC高效液相色譜器一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)(色譜柱)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng)組成,具體包括儲(chǔ)液器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀或數(shù)據(jù)工作站等幾部分。其中輸液泵、色譜柱和檢測(cè)器是HPLC高效液相色譜儀的關(guān)鍵部分。
1、溶劑輸送系統(tǒng)
①儲(chǔ)液器:用來(lái)貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動(dòng)相。配有溶劑過(guò)濾器,以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。
?、诿摎馄鳎好摎獾哪康氖菫榱朔乐沽鲃?dòng)相從色譜柱內(nèi)流出時(shí)釋放出氣泡進(jìn)入檢測(cè)器,從而引起噪聲,不能正常檢測(cè)。
?、圯斠罕茫簩?chǔ)液器中的流動(dòng)相連續(xù)不斷地以高壓形式進(jìn)入液路系統(tǒng),使樣品在色譜柱中完成分離過(guò)程。
?、芴荻认疵撗b置:是在分離過(guò)程中通過(guò)逐漸改變流動(dòng)相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)
進(jìn)樣器:是將樣品送入色譜柱的裝置,進(jìn)樣方式可以分為兩種:閥進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。比較常用的是采用自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣。
3、分離系統(tǒng)
色譜柱:對(duì)樣品進(jìn)行分離,是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟,它的質(zhì)量?jī)?yōu)劣直接影響到分離的效果。
4、檢測(cè)系統(tǒng)
檢測(cè)器:將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測(cè)量的電信號(hào),被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收,得到樣品分離的色譜圖。
5、數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)
對(duì)色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,并參與HPLC高效液相色譜儀器的自動(dòng)控制。
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