Elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)的目標(biāo)是抗原還是抗體?
Elisa檢測(cè)試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被豬藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。
在應(yīng)用Elisa檢測(cè)試劑盒時(shí),首先要清楚下面內(nèi)容:我們測(cè)定Elisa試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原?對(duì)這兩種抗體,抗原分別作了測(cè)試,大家可以根據(jù)我們給出的結(jié)果做個(gè)對(duì)別,從而分辨出Elisa試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原?
1、檢測(cè)抗原:
常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法,其次是競(jìng)爭(zhēng)法。但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測(cè)微生物的抗原,因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,這對(duì)于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競(jìng)爭(zhēng)法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。
2、檢測(cè)抗體:
檢測(cè)抗體種類(lèi)常用的方法是檢測(cè)抗體種類(lèi)的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgA和IgM。這個(gè)方法是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類(lèi)的抗體,接下來(lái)是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡(jiǎn)單,但不適用于檢測(cè)其他種類(lèi)的抗體,因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原。
Elisa檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):
1、試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3、預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋?zhuān)苯尤?0μL加樣即可。
4、所有液體組分使用前充分搖勻。
5、Elisa檢測(cè)試劑盒需要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
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