正在進(jìn)行“戰(zhàn)斗”的CAR-T細(xì)胞

由于CAR-T能夠定向治療疾病，又被稱作給患者“活的藥”。目前CAR-T治療只是用于少量臨床實(shí)驗(yàn)和晚期血癌的患者治療。由于其它的治療方案都已經(jīng)沒(méi)有辦法時(shí)，CAR-T的顯著效果這都引起研發(fā)人員和公眾的關(guān)注，這些患者中包括成人和孩子。2017年，CAR-T治療被美國(guó)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于孩子急性淋巴細(xì)胞白血病和成人晚期細(xì)胞癌。由于T細(xì)胞采取患者本身體內(nèi)，不會(huì)產(chǎn)生免疫系統(tǒng)的抗性，因此幫忙患者進(jìn)行治療疾病。

CAR-T治療流程

標(biāo)準(zhǔn)的CAR-T治療流程主要分為以下七個(gè)步驟進(jìn)行（整個(gè)療程持續(xù)5周左右）：

1.評(píng)估病人是否符合CAR-T治療的適應(yīng)癥

2.分離T細(xì)胞：通過(guò)外周血血細(xì)胞分離機(jī)從腫瘤病人血液中分離出單個(gè)核細(xì)胞，進(jìn)一步純化T細(xì)胞。

3.改造T細(xì)胞：用基因工程技術(shù)，把一個(gè)含有能識(shí)別腫瘤細(xì)胞且激活T細(xì)胞的嵌合抗原受體的病毒載體轉(zhuǎn)入T細(xì)胞，即把T細(xì)胞改造成CAR-T細(xì)胞。

4.擴(kuò)增CAR-T細(xì)胞：在體外培養(yǎng)以大量擴(kuò)增CAR-T細(xì)胞。一般一個(gè)病人需要幾千萬(wàn)，乃至幾億個(gè)CAR-T細(xì)胞，體重越大，需要細(xì)胞越多。

5.CAR-T細(xì)胞回輸入人體：把擴(kuò)增好的CAR-T細(xì)胞通過(guò)靜脈回輸?shù)讲∪梭w內(nèi)，開始進(jìn)行腫瘤細(xì)胞免疫治療。

6.監(jiān)控反應(yīng)：嚴(yán)密監(jiān)護(hù)病人身體反應(yīng)，尤其是細(xì)胞輸入體內(nèi)后一至兩周內(nèi)可能發(fā)生劇烈不良反應(yīng)。

7.評(píng)估治療效果：多在回輸CAR-T細(xì)胞后第15天和第30天評(píng)估對(duì)原發(fā)病的治療效果。

目前研究學(xué)者正在為其他類型的CAR-T治療，即通用型CAR-T細(xì)胞。在采集過(guò)程中，T細(xì)胞不是來(lái)自患者，而是取自已經(jīng)治愈的患者體內(nèi)。這樣就不用針對(duì)每個(gè)病例，而單獨(dú)進(jìn)行培養(yǎng)各自的CAR-T細(xì)胞。通用型CAR-T療法則可以對(duì)異體T細(xì)胞進(jìn)行提前制備，隨時(shí)提供給患者。此外，它也不受患者自身T細(xì)胞質(zhì)量的影響。但它還是一個(gè)新興領(lǐng)域，人們對(duì)CAR-T細(xì)胞治療的科學(xué)認(rèn)識(shí)尚有許多需要解決的問(wèn)題。

相關(guān)操作

1、血液中的白細(xì)胞有五種,按照體積從小到大是:淋巴細(xì)胞,嗜堿性粒細(xì)胞,嗜中性粒細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞。然后采用連續(xù)或者半連續(xù)的密度梯度離心的方法，再經(jīng)過(guò)磁珠法進(jìn)行細(xì)胞富集。

程序控制離心機(jī)

2、通過(guò)分子生物學(xué)操作，讓質(zhì)粒攜帶CAR基因，大量擴(kuò)增質(zhì)粒的目的是擴(kuò)增CAR基因，用于轉(zhuǎn)導(dǎo)使用。其中質(zhì)粒是細(xì)菌、放線菌等生物中染色體（或擬核）以外的DNA分子，存在于細(xì)胞質(zhì)中（但酵母除外，酵母的2 μm質(zhì)粒存在于細(xì)胞核中），具有自主復(fù)制能力，使其在子代細(xì)胞中也能保持恒定的拷貝數(shù)，并表達(dá)所攜帶的遺傳信息，是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA分子。

恒溫振蕩培養(yǎng)箱

3.用貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，通過(guò)病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞的方法生產(chǎn)目的病毒。

滾瓶培養(yǎng)用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)

培養(yǎng)箱用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)