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Elisa檢測(cè)試劑盒具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測(cè)定,為輔助臨床診斷與生物科研起到了積的作用。
Elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)中顯色液A和B有什么作用？
酶聯(lián)免疫診斷試劑盒的底物A就是顯色劑A（含過(guò)氧化氫）為供氫體（DH2）,底物B就是顯色劑B（含TMB）,用于顯色。另外，常用的底物還有：
AP的底物，常用的為對(duì)-硝基苯磷酸脂（PNP），其反應(yīng)物為黃色的對(duì)硝基酚，測(cè)讀波長(zhǎng)為405nm2）GOD的底物，為葡萄糖，供氫體為對(duì)硝基藍(lán)四氮唑，反應(yīng)產(chǎn)物為不溶性的藍(lán)色沉淀。
什么是TMB？TMB即四甲基聯(lián)苯胺是種脂溶性較強(qiáng)的基團(tuán)，因此容易進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反應(yīng)，且由于這種高度的脂溶性，使其易形成多聚體，在HRP活性部位產(chǎn)生粗大的、深蘭色沉淀物，這使得TMB成為組化實(shí)驗(yàn)中的種很好的發(fā)色團(tuán)。同時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的沉淀，使得HRP的活性部位更加暴露，利于酶氧化反應(yīng)進(jìn)行。
TMB的反應(yīng)產(chǎn)物為深藍(lán)色，利于光鏡觀察，且反應(yīng)產(chǎn)物越聚越大，常超出單個(gè)細(xì)胞器的范圍（而DAB則被限制在其內(nèi)），故TMB反應(yīng)的檢測(cè)閾較低。
由于上述優(yōu)點(diǎn)，目TMB常用于光鏡及超微結(jié)構(gòu)水平的HRP及HRP-WGA神經(jīng)投射的研究。需要注意的是：Elisa檢測(cè)試劑盒顯色液中的A液和B液應(yīng)在2h內(nèi)新鮮配制。另外，TMB是種較強(qiáng)的皮膚刺激劑，并有致癌的潛在可能，故使用時(shí)應(yīng)帶手套及在通風(fēng)條件下操作。
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