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            重組人Flt3L表達(dá)出來(lái)的蛋白為什么比實(shí)際要小
            
							
            
								來(lái)源：賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司  
								2021年05月10日 18:14  
                                
    
    
    
        
							
            
						
            
						
            
							 　　重組人Flt3L是一種膜蛋白，能夠刺激早期造血的細(xì)胞因子。在體、離體試驗(yàn)均證實(shí)，可調(diào)節(jié)非紅系造血干/祖細(xì)胞的增殖和分化，與多種細(xì)胞因子協(xié)同，可促進(jìn)前B淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞的增殖、分化和成熟，從而具有重要的抗腫瘤作用。本產(chǎn)品由真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白，是將蛋白基因接入穩(wěn)定表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化CHO-K1細(xì)胞，經(jīng)克隆篩選，質(zhì)量驗(yàn)證，挑選的穩(wěn)定表達(dá)株，由化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基發(fā)酵制備，工藝穩(wěn)定，保證了產(chǎn)品質(zhì)量及批次間的一致性。
            　　重組人Flt3L表達(dá)出來(lái)的蛋白比實(shí)際要小是因?yàn)椋?/div>
            　　1、蛋白本身被降解了，可以存在一些不利于該蛋白穩(wěn)定的蛋白酶
            　　2、翻譯起始位點(diǎn)的問(wèn)題：如果一個(gè)類似于核糖體結(jié)合位點(diǎn)的序列加上適當(dāng)?shù)拈g隔序列出現(xiàn)在了ATG密碼子上游，降解就會(huì)有可能出現(xiàn)。解決的方法可以采用兩端都帶有融合標(biāo)簽的載體，全長(zhǎng)蛋白就可以通過(guò)提高咪唑濃度，在洗脫時(shí)將截短蛋白與全長(zhǎng)蛋白區(qū)分開?；蛘咴诘鞍變啥瞬捎貌煌瑯?biāo)簽，進(jìn)而通過(guò)親和純化的方式得到全長(zhǎng)蛋白。
            　　3、影響蛋白穩(wěn)定性的另外一個(gè)因素是與N端Met相鄰的氨基酸，即N端原則，當(dāng)下列氨基酸出現(xiàn)在N端時(shí):蛋白的半衰期較短，蛋白會(huì)存在不穩(wěn)定降解的問(wèn)題，當(dāng)它出現(xiàn)在第二個(gè)位置上時(shí)，蛋白極度不穩(wěn)定。
            　　重組人Flt3L采用夾心法酶聯(lián)免疫吸附法，用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞裂解液或細(xì)胞培養(yǎng)上清中Flt3L的含量。預(yù)先包被的抗體和檢測(cè)相抗體都是Flt3L單克隆抗體。檢測(cè)相抗體經(jīng)生物素標(biāo)記。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人Flt3L呈正相關(guān)。
             
            重組人Flt3L
             
            
						
            
					
            
										
										
            
						
						  
            
							
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