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            小鼠骨髓瘤SP2/0細(xì)胞培養(yǎng)傳代方法

            來源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2021年05月27日 10:12  

              細(xì)胞信息表

             

            細(xì)胞名稱        小鼠骨髓瘤SP2/0

             

            種屬            小鼠

             

            組織來源          骨髓

             

            生長狀態(tài)          半貼壁生長

             

            形態(tài)特征          上皮細(xì)胞樣

             

            培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型:DMEM培養(yǎng)基

                          FBS:10%

                          抗生素:雙抗

                          培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5%

             

            傳代方法          收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài):

                              如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培

                          養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

                              如果細(xì)胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

                          傳代方法:

                          1棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS1-2次。

                          21ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸

                          后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓

                          后加*培養(yǎng)基終止消化。

                          3一般沒有特殊說明,細(xì)胞一般是一傳二。

             

            凍存方法          70%*培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,先用現(xiàn)配。

                          儲存:液氮中長期保存。

             

                        1觀察細(xì)胞最好在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

                          2在運(yùn)輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可

                          離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

                          3收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請于一周內(nèi)與我們

                          聯(lián)系。

             

             

             

            實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

             

            WB代做

            HE染色

            免疫熒光染色

            蛋白相互作用分析

            ELISA免費(fèi)代檢測

            免疫組化

            熒光定量PCR

            番紅O固綠染色

            流式細(xì)胞檢測

            激光共聚焦

            透射電鏡服務(wù)

            DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

            免疫共沉淀(Co-IP

            DNA甲基化

            掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

            microRNA 測序

            半定量RT-PCR

            分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

            原位雜交(FIsh

            石蠟/冰凍切片

            RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP

            CCK8檢測

            蛋白雙向(2-D)電泳

            蛋白雙向2D-WB

            ATP/ADP檢測

            Taqman探針

            細(xì)胞劃痕

            基因組DNA提取

             

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