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穩(wěn)定細(xì)胞株廣泛用于許多重要的應(yīng)用，包括生物制品（如重組蛋白和單克隆抗體）生產(chǎn)、藥物篩選和基因功能研究。開發(fā)穩(wěn)定細(xì)胞株的過程通常始于將所需的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至選定的宿主細(xì)胞，一般是 CHO 或 HEK 293 細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后，研究人員隨后篩選和定量分析高表達(dá)的細(xì)胞克隆。
細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞株開發(fā)的基礎(chǔ)，無論是細(xì)胞轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)基優(yōu)化，還是抗體表達(dá)檢測等實(shí)驗(yàn)都在細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上完成。細(xì)胞培養(yǎng)是一個長流程，精細(xì)，耗費(fèi)時間和人力的流程，定期的細(xì)胞計(jì)數(shù)接種，細(xì)胞換液，細(xì)胞轉(zhuǎn)染等繁瑣的實(shí)驗(yàn)對工作人員的挑戰(zhàn)極大，且在高通量的人工操作中易帶入污染而導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)及篩選的失敗。高通量、標(biāo)準(zhǔn)化、自動化的細(xì)胞培養(yǎng)能幫助我們在獲得更準(zhǔn)確的結(jié)果的同時加速細(xì)胞株開發(fā)進(jìn)度。
一旦檢測到這些高產(chǎn)細(xì)胞株，便進(jìn)一步對這些細(xì)胞和其產(chǎn)生的蛋白質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。傳統(tǒng)上用于細(xì)胞株開發(fā)的手動篩選方法耗時且需要大量勞力，因此對于此類工作，存在對高通量、自動化解決方案的巨大需求。
細(xì)胞培養(yǎng)方法多樣講解：
透射光分割（分析）算法提高了不同細(xì)胞類型計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，通常用于對未染色的活細(xì)胞或固定細(xì)胞進(jìn)行成像。另外還有使用熒光方法檢測細(xì)胞核或細(xì)胞體的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞計(jì)數(shù)方法。圖像細(xì)胞計(jì)數(shù)法是一種將低倍率顯微鏡與成像和分析工具相結(jié)合的細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)。圖像細(xì)胞計(jì)數(shù)法有助于在單次檢測中提供關(guān)于大量細(xì)胞的細(xì)胞特性信息。
圖像細(xì)胞計(jì)數(shù)法可用于無標(biāo)記或熒光標(biāo)記細(xì)胞，可對一個細(xì)胞群多次執(zhí)行，以隨時提供關(guān)于細(xì)胞動力學(xué)的信息。
活細(xì)胞成像是通過顯微觀察研究活細(xì)胞的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。它可以實(shí)時顯示和定量細(xì)胞的動態(tài)變化過程?；罴?xì)胞成像包含多種方向和生物應(yīng)用 — 無論是對活細(xì)胞進(jìn)行長期動力學(xué)檢測，還是進(jìn)行熒光標(biāo)記。
細(xì)胞的單克隆源性驗(yàn)證在確保生物制藥產(chǎn)品的純度和均一性上至關(guān)重要，F(xiàn)DA 的政策和法規(guī)都強(qiáng)制要求生物制藥企業(yè)提供清晰圖片證據(jù)以證明單克隆抗體研發(fā)過程中的單克隆源性。這些要求對我們的單克隆接種及成像設(shè)備提出了更高的要求。細(xì)胞株開發(fā)就是發(fā)現(xiàn)源自單個細(xì)胞的克隆，其可穩(wěn)定高表達(dá)目標(biāo)治療性蛋白。此過程的第一步是分離活的單細(xì)胞。有限稀釋是一種依賴于統(tǒng)計(jì)概率的技術(shù)，但很耗時。
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