凝膠色譜凈化在食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量測定

       凝膠層析色譜作為一種樣品的凈化手段之一，在國外應(yīng)用的已較普遍，在我國應(yīng)用的還不普遍，隨著分析技術(shù)的發(fā)展，GPC在我國農(nóng)藥殘留前處理分離、凈化方面的應(yīng)用將越來越普遍，尤其是在富含脂肪、色素等大分子的樣品分離凈化方面，具有明顯的凈化效果。

　　凝膠滲透色譜的基本組成為六通閥、凈化柱、泵等；全自動(dòng)型主要由樣品進(jìn)樣和收集系統(tǒng)、泵、分離柱、溶劑及計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)等組成。

　　凝膠滲透色譜的分離原理與通常使用的柱層析的區(qū)別主要是：通常柱層析是利用填料、樣品和淋洗劑之間極性的差別來達(dá)到分離目的，而凝膠層析儀則是利用化合物中各組分分子大小不同而淋出順序先后也不同而達(dá)到分離目的的，淋洗溶劑的極性對(duì)分離的影響并不起決定作用；對(duì)于凈化含脂肪、色素較多的樣品具有明顯的優(yōu)勢。

       有機(jī)氯農(nóng)藥是用于防治植物病，蟲害的組成成分中含有有機(jī)氯元素的有機(jī)化合物。主要分為以苯為原料和以環(huán)戊二烯為原料的兩大類。以苯為原料的農(nóng)藥包括使用最早，應(yīng)用*的殺蟲劑DDT和六六六等，以環(huán)戊二烯為原料的有機(jī)氯農(nóng)藥包括七氯，DIE氏劑，AI氏劑等。 

常用的有機(jī)氯農(nóng)藥具有系列特性：

1.揮發(fā)性小，使用后消失緩慢 

2.一般是疏水性的脂溶性化合物 

3.氯苯架構(gòu)穩(wěn)定，不易被體內(nèi)酶降解，在生物體內(nèi)消失緩慢 

4.土壤微生物對(duì)這些農(nóng)藥的作用大多是把他們還原或氧化為類似的衍生物，這些產(chǎn)物也像其親體一樣存在著殘留毒性問題。

有機(jī)氯農(nóng)藥通過食物鏈進(jìn)入人體和動(dòng)物體，能在心臟，肝，腎等組織中蓄積，蓄積的殘留農(nóng)藥也能通過母乳排出，或轉(zhuǎn)入卵蛋等組織，影響子代，因此各國對(duì)有機(jī)氯農(nóng)藥在食品中的殘留控制甚嚴(yán)，美國，日本等不容許在食品中檢測出環(huán)戊二烯殺蟲劑。

【試劑】

1.丙酮（CH3COCH3）：分析純

2.石油醚：沸程30℃-60℃，分析純

3.乙酸乙酯（CH3COOC2H5）：分析純

4.環(huán)己烷（C6H12）：分析純

5.氯化鈉（NaCl）:分析純

6.正己烷（n-C6H14）:分析純

農(nóng)藥標(biāo)品：ａ-六六六、六氯苯、ß-六六六、r-六六六、五氯硝基苯、δ-六六六、五氯苯胺、七氯、五LVBENJI硫醚、艾試劑、氧氯丹、環(huán)氧七氯、反氯丹、ａ-硫丹、順氯丹、ρ,ρ’-滴滴伊、DIE氏劑、異DIE氏劑、ß-硫丹、ρ,ρ’-滴滴滴、ο,ρ’-滴滴涕、異DIE氏劑醛、硫丹硫酸鹽、ρ,ρ’-滴滴涕、異DIE氏劑酮、滅蟻靈、，純度均不低于98%。

【儀器】

1.氣相色譜儀：配有電子捕獲檢測器

2.凝膠凈化系統(tǒng)：LC500凝膠凈化系統(tǒng)

3.凝膠凈化色譜柱

4.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀

【樣品處理】

1.試樣制備

肉去筋后，切成小塊，制成肉糜；乳品混勻

2.提取與分配

肉類：稱取試樣20g(精確到0.01g),加水15ml,加40ml BIN酮，振搖30min。

乳類：稱取鮮乳試樣20g(精確到0.01g),加40ml BIN酮。

分別向肉類，乳類加入氯化鈉6g,充分搖勻，再分別加入30ml石油醚，振搖30分鐘。靜置分層后，將有機(jī)相全部轉(zhuǎn)移至100ml具塞三角瓶中經(jīng)無水硫酸鈉干燥，稱取35ml于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，濃縮至約1ml，加約2ml乙酸乙酯-環(huán)己烷（等體積混合）溶液再濃縮，重復(fù)此操作3次，濃縮至約1ml，備用。

3、凈化

凝膠凈化系統(tǒng)：以乙酸乙酯-環(huán)己烷（等體積）作為流動(dòng)相，泵流速設(shè)為5.0ml/min,抽取試樣注入SGPCS-凝膠凈化系統(tǒng)，收集7.5min-15min流分。將收集的流分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至1ml，用氮?dú)獯抵两?，用正己烷定容?span>1ml。

4、色譜分析

分別吸取1ul混合標(biāo)準(zhǔn)液及試樣凈化液注入氣相色譜儀中，記錄色譜圖，用保留時(shí)間定性，試樣和標(biāo)準(zhǔn)品的峰高或者峰面積比較定量。

                                                                    色譜譜圖

1. ａ-六六六；2. 六氯苯；3.ß-六六六；4.r-六六六；5.五氯硝基苯；6.δ-六六六；7.五LV苯胺；8.七氯；9.五LV苯基硫醚；10.AI試劑；11.氧氯丹；12.環(huán)氧七氯；13.反氯丹；14.ａ-硫丹；15.順氯丹；16.ρ,ρ’-滴滴伊；17.DIE氏劑；18.異DIE氏劑；19.ß-硫丹；20.ρ,ρ’-滴滴滴；21.ο,ρ’-滴滴涕；22.異DIE氏劑醛；23.硫丹硫酸鹽；24.ρ,ρ’-滴滴涕；25.異DIE氏劑酮；26.滅蟻靈。