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基本原理
細(xì)胞凍存時(shí)保存細(xì)胞的最基本方法，當(dāng)不加保護(hù)劑直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水會(huì)形成冰晶，從而引起細(xì)胞死亡。因此，正常情況下凍存細(xì)胞，通常會(huì)向培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑，使用逐步降低溫度的方法，以減少凍存過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)冰晶形成、保護(hù)細(xì)胞。
注意事項(xiàng)
1、凍存細(xì)胞選擇細(xì)胞增殖旺盛、情況穩(wěn)定、無(wú)污染、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。
2、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程必須遵循無(wú)菌操作。
3、細(xì)胞凍存液的配方應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的類型進(jìn)行調(diào)整，摸索對(duì)應(yīng)細(xì)胞最適的配方。
4、細(xì)胞凍存過(guò)程，降溫速率要小，遵循慢凍原則，可借助程序降溫盒來(lái)完成。
5、凍存細(xì)胞要做好標(biāo)記，名稱、日期、凍存人等。
6、選擇質(zhì)量好的凍存管進(jìn)行細(xì)胞凍存，防止管凍裂。
7、凍存細(xì)胞前要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，建議一管中細(xì)胞數(shù)量為106。
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