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            goldbio-活體成像技術(shù)以及相關(guān)產(chǎn)品對比

            來源:蘇州螞蟻淘生物科技有限公司   2021年08月11日 11:47  

            活體成像技術(shù)

            早在1999年由美國哈佛大學(xué)Weissleder博士*提出了分子影像學(xué)(molecular imaging,MI)的概念,即應(yīng)用影像學(xué)的方法對活體狀態(tài)下的生物過程進行細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究。活體成像便是基于分子影像學(xué)孕育而生的,通過這個成像系統(tǒng),可以觀測活體動物體內(nèi)腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移,感染性疾病的發(fā)展進程,特定基因的表達等生物學(xué)過程

            活體成像技術(shù)主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)熒光(fluorescence)兩種技術(shù)。

            生物發(fā)光是用熒光素酶基因標(biāo)記細(xì)胞或DNA。

            熒光技術(shù)則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進行標(biāo)記。

            這一技術(shù)對腫瘤微小轉(zhuǎn)移灶的檢測靈敏度*,不涉及放射性物質(zhì)和方法, 非常安全。操作極其簡單、所得結(jié)果直觀、靈敏度高。

             

            活體成像兩種檢測技術(shù)介紹

            活體成像

            特點

            優(yōu)點

            缺點

            生物發(fā)光檢測

            bioluminescence

            熒光素酶(Luciferase)對基因、細(xì)胞和活體動物進行標(biāo)記;

            熒光素酶催化底物(例如熒光素鉀鹽)反應(yīng)后,會產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。這種光是由化學(xué)反應(yīng)而來,不需要激發(fā)光

            標(biāo)記方法是通過克隆技術(shù),將熒光素酶的基因插入到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體內(nèi),通過對克隆細(xì)胞進行篩選,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達熒光素酶的細(xì)胞株。再將細(xì)胞株轉(zhuǎn)移至特定的小鼠體內(nèi)形成模型。

            特異性強,無自發(fā)熒光;

            ★高靈敏度,在體內(nèi)可檢測到幾百個細(xì)胞,檢測的深度在3-4cm;

            ★定量精確

             

            ★信號較弱,檢測時間較長;★儀器精密度要求較高;

            ★細(xì)胞或基因需要轉(zhuǎn)基因標(biāo)記;

            ★不可用于人體,不適用于抗體、多肽等標(biāo)記

            熒光檢測

            fluorescence

            采用熒光報告基因 (GFP、RFP等) 或熒光染料進行標(biāo)記;

            ★需要外接激發(fā)光源,利用報告基因、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光,就可以形成體內(nèi)的生物光源。

            ★熒光染料、蛋白標(biāo)記能力強;

            ★信號強,成像速度快,操作簡便,實驗成本較低;

            ★未來可用于人;

            ★適用范圍廣,可以是動物、細(xì)胞、微生物,也可以是抗體、藥物、納米材料等。

            ★存在自發(fā)熒光,影響靈敏度;

            ★光容易被動物組織吸收;

            ★檢測深度受限;

            ★背景光干擾,定量準(zhǔn)確度低

            ★生物發(fā)光檢測技術(shù)相關(guān)試劑和推薦品牌(以2020年價格為例比較)

            熒光素酶及對應(yīng)底物

            底物產(chǎn)品品牌 (Goldbio)

            底物產(chǎn)品品牌 (Biotium)

            底物產(chǎn)品品牌(Bio-world)

            底物產(chǎn)品品牌(sigma)

            螢火蟲熒光素酶firefly luciferase/底物D-Luciferin

            (D-熒光素)

             

             

             

             

             

            D-Luciferin, Potassium Salt(D-熒光素鉀鹽)

            D-Luciferin,Potassium Salt(D-熒光素鉀鹽)

            D-Luciferin, Potassium Salt(D-熒光素鉀鹽)

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            LUCK-100mg

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            無鈉鹽

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            D-LuciferinFirefly,free acid (熒光蟲熒光素游離酸)

            D-Luciferin, Free Acid(D-熒光素游離酸)

             

            D-Luciferin Free Acid(D-熒光素游離酸)

             

            D-Luciferin

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            海腎熒光素酶Renilla luciferase/ Coelenterazine(腔腸素)

            Coelenterazine(天然腔腸熒光素)

            Coelenterazine(天然腔腸熒光素)

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            CZ2.5mg

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            ★活體技術(shù)熒光檢測

            熒光蛋白標(biāo)記

            適用于標(biāo)記細(xì)胞、病毒、基因等,通常使用的是 GFP、EGFP、RFP(DsRed)等;


            熒光染料標(biāo)記

            適用于標(biāo)記抗體、多肽、小分子藥物等;常用的有 Cy3、Cy5、Cy5.5 及 Cy7


            量子點標(biāo)記(新的標(biāo)記方法)

            適用于標(biāo)記腫瘤主要應(yīng)用在活細(xì)胞實時動態(tài)熒光觀察與成像;

            量子點(quantum dot) 是一種能發(fā)射熒光的半導(dǎo)體納米微晶體,外觀恰似一極小的點狀物。量子點熒光比有機熒光染料的發(fā)射光強的 20 倍,穩(wěn)定性強 100 倍以上,具有熒光發(fā)光光譜較窄、量子產(chǎn)率高、不易漂白、激發(fā)光譜寬、顏色可調(diào),并且光化學(xué)穩(wěn)定性高,不易分解等諸多優(yōu)點。


             


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