接種是微生物技術(shù)中最基本的操作之一，接種技術(shù)在微生物的分離純化、生理生化等試驗(yàn)中都非常重要。由于接種的目的不同，所采用的接種方式也不同，接種可分成斜面接種、穿刺接種和三點(diǎn)接種等。選擇正確的接種方法，對于微生物的分離、純化、增殖和鑒別都有重要作用。因接種方法的不同，常常采用不同的接種工具，如接種環(huán)、接種針、移液管和涂布棒等。

在接種過程中，必須進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作無菌操作一般是在無菌室或接種箱內(nèi)進(jìn)行，并靠近煤氣燈（或酒精燈，一般用酒精噴燈）的火焰操作。有條件的也可在超凈工作臺上操作。

微生物三點(diǎn)接種法：三點(diǎn)接種是為了獲得單菌落所使用的方法之一，它是在培養(yǎng)皿上接種，即用接種針蘸取少量霉菌孢子，在澆有瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿（俗稱平板）上，以等邊三角形的三點(diǎn)輕輕點(diǎn)一點(diǎn)，培養(yǎng)后即在此三點(diǎn)上長出菌落。其優(yōu)點(diǎn)是:同種菌落有三個(gè)重復(fù)，同時(shí)在菌落彼此相接近的邊緣常留有一條狹窄的空白地帶此處菌絲生長稀疏，較透明，還分化出典型子實(shí)體，因此可以直接把培養(yǎng)皿放在低倍鏡下觀察，便于根據(jù)形態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行菌種的鑒定。具體操作如下

步驟一，倒平板，將已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基放在水浴鍋上加熱熔化，待冷卻至45℃（手握不覺太燙為宜）后，用無菌操作法倒平板。

步驟二，標(biāo)明三點(diǎn)位置，待平板凝固后，在培養(yǎng)皿底部注明菌種、日期等，并以等邊三角形的三個(gè)頂點(diǎn)標(biāo)上記號。

步驟三，右手拿接種針，先在火焰上燒紅滅菌并在平板培養(yǎng)基的邊緣冷卻且蘸濕。

步驟四，蘸取孢子，將滅過菌而且蘸濕的接種針伸入菌種管，用針尖蘸取少量霉菌孢子。

步驟五，點(diǎn)接，以垂直法或水平法把接種針上的孢子點(diǎn)到預(yù)先標(biāo)記好的部位，注意切勿刺破培養(yǎng)基。

將培養(yǎng)皿倒置，于28℃恒溫條件下培養(yǎng)，48h后觀察生長情況。

在接種的過程中需要注意哪些問題呢？

（1）接種室應(yīng)保持清潔，用煤粉酚皂液擦洗臺面及墻壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均應(yīng)用紫外燈滅菌。定期對接種室作無菌程度的檢查。

（2）進(jìn)入接種室前，應(yīng)先做好個(gè)人衛(wèi)生工作，在緩沖間內(nèi)要更換工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只準(zhǔn)在接種室內(nèi)使用。不準(zhǔn)穿到其它地方去，并要定期更換、消毒。

（3）接種的試管、三角并瓶等應(yīng)做好標(biāo)記，注明培養(yǎng)基、菌種的名稱、日期。移入接種室內(nèi)的所有物品，均須在緩沖室用70%酒精擦試干凈。

（4）接種前，雙手用70%酒精或新潔爾消毒，操作過程不離開酒精燈火焰；棉塞不亂放；接種工具使用前后均需火焰滅菌。

（5）恒溫培養(yǎng)箱應(yīng)經(jīng)常清潔消毒。