我們在進行分子生物學(xué)實驗的時候，通常會對生物大分子的濃度有一定的要求，比如您要進行轉(zhuǎn)染實驗，加入細胞的質(zhì)粒濃度要求在1 µg/µl，這樣才能得到比較高的轉(zhuǎn)染效率。可是您抽提的質(zhì)粒濃度只有200 ng/µl，這時候該怎么辦呢？如何將質(zhì)粒濃度濃縮到理想的濃度呢？

常用的方法有兩種：乙醇沉淀法和離心濃縮法。

乙醇沉淀法：

操作步驟：
1. 估算含有質(zhì)粒溶液的體積V，加入V/9體積的3M NaAc ,使得NaAc終濃度為0.3M
2. 加入2倍體積的冷無水乙醇，冰上或者-20℃孵育20min
3. 最大離心速度（＞13000rpm)離心10min，棄去上清
4. 用75%乙醇洗滌2次
5. 室溫晾干
6. 加入適當(dāng)體積的水或TE buffer 溶解即可
（以上步驟來自分子克?。?br/>
經(jīng)過一系列的復(fù)雜操作，再去做一下核酸定量檢測，你往往會發(fā)現(xiàn)，濃度比理想的要低很多！這是因為在整個過程中比較容易產(chǎn)生核酸的損失，比如乙醇沉淀步驟沒有將核酸*析出、離心步驟沒有*將核酸*離心下來、去除上清時不小心將核酸吸出等。

離心濃縮法：
原理：借助于真空離心濃縮儀，將待濃縮的核酸樣品放入離心機中，用真空泵提高離心機中的真空度，在低壓下核酸溶液的沸點降低，在室溫下即可快速揮發(fā)以達到濃縮核酸溶液的目的。

操作步驟：
1. 將樣品管放入離心機中
2. 設(shè)置離心機轉(zhuǎn)速、時間，點擊運行
3. 打開真空泵
4. 濃縮結(jié)束后取出樣品即可

采用離心濃縮法具有更大的優(yōu)勢：
1. 操作簡單，避免復(fù)雜操作帶來樣品損失及污染
2. 濃縮速度快，100µl的待濃縮樣品濃縮至20µl大約需要40min
3. 成功率高，整個過程核酸分子均在EP管中，避免核酸損失
4. 更好的保護核酸，常溫低壓下進行核酸濃縮，避免核酸降解
因此，離心濃縮法越來越受到用戶的青睞！