DMEM低糖培養(yǎng)基的知識(shí)概述與應(yīng)用！

一、背景

DMEM低糖培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時(shí)又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長，適于生長較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。

DMEM是dulbecco's modified eagle medium的縮寫，所以其特點(diǎn)主要包括以下:(1)氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等;(2)維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍;3)含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)--丙酮酸;(4)含有微量的鐵離子。

DMEM培養(yǎng)基主要有以下用途：用于成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞（SP2/0）、表皮喉癌細(xì)胞（HEP-2）、Hela（宮頸癌細(xì)胞）、CHO（中國倉鼠卵巢細(xì)胞）等細(xì)胞的培養(yǎng),用于疫苗企業(yè)病毒株的傳代培養(yǎng)供后續(xù)抗原的制備,用作動(dòng)物疫病病毒采樣及病毒分離和維持液的基礎(chǔ)液、免疫治療用細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)液以及人病毒分離用生長液及維持液的基礎(chǔ)液。

二、應(yīng)用

用于紅景天苷對(duì)高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究：

探討紅景天苷對(duì)高糖損傷人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。

方法：體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)株貼壁后,以MTS法觀察不同葡萄糖濃度對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞活力影響,根據(jù)結(jié)果選擇糖濃度5.5mmol/L作為正常對(duì)照組,糖濃度45mmol/L組作為模型損傷組。

以MTS法觀察不同紅景天苷濃度對(duì)正常培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞活力的影響；不同劑量紅景天苷作用于高糖損傷的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞組,分組為正常對(duì)照組、模型損傷組、紅景天苷不同劑量組(低劑量組、中劑量組、高劑量組、*劑量組),通過MTS法檢測(cè)細(xì)胞活力、WST-1法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活力、TBA法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)丙二醛(MDA)含量來評(píng)估紅景天苷對(duì)高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。

結(jié)果：不同紅景天苷濃度培養(yǎng)的正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(24 h F=0.220,p=0.93;48 h F=0.106,p=0.98)。與模型損傷組比較,細(xì)胞培養(yǎng)24 h、48h,紅景天苷中劑量組、高劑量組、*劑量組細(xì)胞活力均明顯增加(P<0.05)。細(xì)胞內(nèi)MDA含量均明顯下降(P<0.05),細(xì)胞內(nèi)SOD活力均明顯增加(P<0.05);紅景天苷低劑量組4 8h細(xì)胞活力高于模型損傷組(P<0.05),細(xì)胞內(nèi)MDA含量下降(P<0.05)。

結(jié)論：

1、糖濃度45mmol/L可以作為高糖損傷HUVEC的糖濃度;高糖可以降低HUVEC的細(xì)胞活性,該損傷作用是通過抑制HUVEC的SOD活性,增高HUVEC的MDA含量來實(shí)現(xiàn)的。

2、紅景天苷可以恢復(fù)高糖損傷的HUVEC細(xì)胞活力,為細(xì)胞提供保護(hù)作用。該保護(hù)作用是通過增強(qiáng)高糖損傷的HUVEC的SOD活性,降低高糖損傷的HUVEC的MDA含量實(shí)現(xiàn)。

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