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            「表達載體、生產(chǎn)疫苗」:釀酒酵母的新可能

            來源:杭州大微生物技術(shù)有限公司   2022年01月18日 13:38  

            宮頸癌是常見的女性惡化腫瘤,其發(fā)生率在女性群體中僅次于乳腺癌。世衛(wèi)組織統(tǒng)計顯示,2020年全球?qū)m頸癌新發(fā)病例超過60.4萬例,其中近11萬例在中國。目前關(guān)于宮頸癌發(fā)生機制尚未*明確,主要與人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染有關(guān),其中HPV16、18、31、45型是宮頸癌的高危型。

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            為了對抗這一癌癥,人類研發(fā)出了HPV疫苗。HPV疫苗分為治療性疫苗和預(yù)防性疫苗,目前國家所提倡接種的HPV疫苗是預(yù)防性疫苗,主要使用基因工程技術(shù)進行生產(chǎn),通過誘導(dǎo)特異性中和抗體,阻斷病毒的早期感染來預(yù)防病毒相關(guān)疾病的發(fā)生。

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            當(dāng)我們在接種HPV疫苗時,能看見疫苗包裝盒上有“釀酒酵母”的字眼。

            釀酒酵母是什么?難道HPV疫苗的制作過程跟釀酒有關(guān)系嗎?

             

             


            釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又稱面包酵母或者出芽酵母,細胞為球形或者卵形,直徑5-10μm,是第一個完成基因組測序真核生物,測序工作于1996年完成。

             

            作為一種單細胞真核生物,釀酒酵母具有一切真核細胞生命活動最基本特征,又有實驗所需微生物應(yīng)具備的代謝周期快、生長迅速、操作方便等許多優(yōu)點,一直是基礎(chǔ)及應(yīng)用研究的主要對象,在2000年被NIH選為標(biāo)準(zhǔn)微生物模型系統(tǒng),在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。 

             

            重組全釀酒酵母疫苗是一種新型的基因工程疫苗,以釀酒酵母菌作為抗原表達載體構(gòu)建的重組全酵母疫苗,既能攜帶特異性目的抗原,又能揮發(fā)出免疫佐劑作用,能有效地誘導(dǎo)出抗原特異性的免疫應(yīng)答,該類疫苗已在抗腫瘤及抗病毒感染的防治研究中,顯示出了很好的研究價值和應(yīng)用前景。

             

            1981年開始用釀酒酵母表達外源基因,目前利用釀酒酵母為宿主系統(tǒng)表達了許多外源基因產(chǎn)物,如乙型肝炎疫苗、人胰島素、人粒細胞集落刺激因子、人血管抑制素等。

             


            釀酒酵母在自然界中分布較廣,屬于兼性厭氧微生物,主要是從冰葡萄汁或柑橘果中利用酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基和麥芽汁瓊脂平皿培養(yǎng)基分離純化而來。

            1、富集培養(yǎng):取適量樣品加入富集培養(yǎng)基,進行目標(biāo)菌株富集;

            2、梯度稀釋:將富集培養(yǎng)液按10倍梯度進行稀釋;

             

            DW-9系列微生物試劑分液器

            DW-9系列微生物試劑分液器是一款精密輸送液體的電子蠕動泵分液系統(tǒng),適用于培養(yǎng)基、緩沖液和稀釋液的自動批量分裝,廣泛應(yīng)用于各種食品、藥品企業(yè)、政府檢測機構(gòu)和科研單位的專業(yè)微生物實驗室。

             

            3、分離純化:取梯度稀釋液均勻涂布于分離培養(yǎng)基,放置培養(yǎng)箱進行培養(yǎng),然后再進行目標(biāo)菌株的初篩及復(fù)篩;

             

            DW-16型自動細菌涂布接種儀

            DW-16型自動細菌涂布接種儀由放置培養(yǎng)皿的可旋轉(zhuǎn)平臺(自動)和可變速驅(qū)動電機組成,是杭州大微專為“經(jīng)典培養(yǎng)法”微生物實驗中的“細菌涂布接種”環(huán)節(jié)而設(shè)計制造,塑料平皿適用。

             

            4、菌種鑒定:通過形態(tài)學(xué)特征并結(jié)合生理生化實驗進行菌株鑒定。

             

            杭州大微DW-M80型自動微生物生化鑒定系統(tǒng)通過生化反應(yīng)原理(包括酶底物反應(yīng)/糖利用反應(yīng)/同化反應(yīng)/氨基酸實驗等)捕獲細菌的生化表型特征,對微生物進行鑒定;結(jié)合微生物激光透射比色法,對抗菌藥敏試驗進行分析。


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