對于重組人GDF3檢測流程你是否清楚

來源：賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司 2022年01月20日 15:48

　　重組人GDF3試劑盒具有的三種特性：

　　靈敏度：最小的GDF-3 檢測濃度小于30pg/ml。特異性：可同時(shí)檢測重組或天然的人GDF-3。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。

　　重組人GDF3其要求有哪些：

　　1. 生物活性：進(jìn)行相應(yīng)的體外或體內(nèi)活性檢測。

　　2. 純度：應(yīng)用兩種方法分析產(chǎn)品純度。

　　3. 真實(shí)性：重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析；必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實(shí)性。

　　4. 內(nèi)毒素：kinetic LAL法檢測內(nèi)毒素。

　　5. 蛋白含量：通過紫外光譜分析，電泳檢測；必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。

　　6. 微生物：重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。

　　重組人GDF3檢測流程：

　　1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。

　　2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。

　　3. 每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。

　　4. 洗板：同前。

　　5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。

　　6. 洗板：同前。

　　7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。

　　8. 每孔加入100ul終止液混勻。

　　9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。

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