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衍生化是指被測物質(zhì)與相應的試劑發(fā)生化學反應，改變被測物質(zhì)的化學和物理性質(zhì)，提高被測物質(zhì)的檢測靈敏度，改善被測物質(zhì)混合物的分離度，從而達到利于分析的目的。衍生化在HPLC分析中應用廣泛，其中在線柱后衍生使用居多。傳統(tǒng)的在線柱后衍生需要一個獨立的泵來輸送衍生試劑以實現(xiàn)衍生的目的，但這些額外的獨立裝置有時由于與液相色譜系統(tǒng)本身不能進行很好的聯(lián)用，往往導致運行不甚理想。
柱后衍生裝置由于具有兩個獨立的泵和流路，一個泵進行分析，另外一個泵可以完成如輸送衍生試劑等的輔助功能，可以很好地實現(xiàn)在線柱后衍生應用，而且這些功能很多情況只需要一個簡單的柱后三通或反應管的連接就可以實現(xiàn)。此外，在HPLC和MS聯(lián)用時，為了增強離子化效率，需要另外的流路泵入甲酸或乙腈，使用賽默飛雙三元液相色譜系統(tǒng)也可以簡單方便地實現(xiàn)這樣的功能。
反梯度補償技術是指在色譜柱后進入檢測器前加入另一與分析時溶劑組成相同但比例相反的溶劑，使進入檢測器的溶劑濃度保持不變，從而使檢測條件更加穩(wěn)定，提高檢測效果。當使用基于霧化機理的檢測器進行梯度分析時，由于被測物質(zhì)的響應值與霧化效率密切相關，而流動相的組成是影響霧化效率的重要因素，但由于梯度分析時流動相的組成在不斷改變，樣品中各組分的霧化效率也隨著在不斷變化，這將直接影響待測物質(zhì)響應的一致性。使用柱后衍生裝置，通過應用反梯度補償技術可以避免該因素對檢測的影響，從而實現(xiàn)對目標物的準確分析。
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