Colorcode Prestained Protein Marker (15-130 kDa) 彩色預(yù)染蛋白質(zhì)Marker (15-130 kDa)
多肽修飾主要是肽鏈主鏈結(jié)構(gòu)和側(cè)鏈基團的修飾。通過修飾能夠改變肽類化合物的物理化學(xué)性質(zhì),優(yōu)化其在體內(nèi)的有效利用。經(jīng)過修飾的多肽類藥物,能夠顯著降低免疫原性、減少毒負作用、增加水溶性、延長體內(nèi)作用時間、改變體內(nèi)分布狀況等等。目前多肽標(biāo)記及修飾的內(nèi)容非常多,廣泛應(yīng)用在多肽藥物,多肽生物學(xué),多肽抗體以及多肽試劑的研究中。目前應(yīng)用廣泛的有:非放射性核素標(biāo)記(C13,H2),熒光標(biāo)記(FAM,F(xiàn)ITC),生物素標(biāo)記,磷酸化修飾等。
熒光標(biāo)記由于沒有放射性,實驗操作簡單。因此,目前在生物學(xué)研究中熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛,熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系,對于有游離羧基的采用的方法與接肽反應(yīng)相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。但是對于FITC標(biāo)記,需要在連接FITC前,增加一個氨基己酸,避免在切割的過程中被TFA切割掉。
如何選擇合適的熒光標(biāo)記基團取決于您的實驗需求。
藥理學(xué)實驗研究基本分為體內(nèi)研究和體外研究兩大類。
對于體內(nèi)研究,一般選擇發(fā)射波長在650-900nm的熒光基團,例如:ICG、Cy5.5和 Nile Blue。這是因為這類基團所發(fā)出的熒光具有較好的組織穿透能力,受背景干擾較小(水、血紅蛋白和脫氧血紅蛋白一般都會產(chǎn)生背景干擾吸收,其區(qū)域在560nm左右)。
對于體外研究,發(fā)射波長在400到600nm的熒光基團最為常用,例如:AMC、FITC和TAMRA。
熒光標(biāo)記的多肽在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用是很廣泛的。例如:用Cy5.5標(biāo)記的目標(biāo)多肽研究對 c-Met受體的綁定作用。有人設(shè)計含有KSLSRHDHIHHH序列的cMBP,其C端為GGGSC, C端Cys用 Cy5.5-Maleimide標(biāo)記其巰基側(cè)鏈。研究結(jié)果表明:上述Cy5.5-cMBP多肽與U87MG腫瘤細胞共孵24小時后,具有較高的癌細胞攝取值,其響應(yīng)濃度在納摩爾級別。多肽保存
為了防止或盡量減少多肽降解,請將多肽以凍干粉形式保存在-20°C,-80°C更佳。如果需要保存溶液肽,最好分成小樣存放,以避免反復(fù)凍融。一份樣品融凍后未用完,應(yīng)扔掉。細菌降解有時會成為溶液肽的麻煩,所以請將肽溶于無菌水或肽溶液過濾除菌。
多肽保存方法建議
所有的凍干多肽產(chǎn)品可以在常溫下避光運輸,并可以在室溫條件下保存幾天或者少于一個星期,多肽性狀是穩(wěn)定的。所有的凍干多肽產(chǎn)品,都必須保存在干燥低溫的條件下,以-20℃的低溫為佳,若有條件最好保存在-80℃以下,在這樣的條件下大多數(shù)多肽可存放1-2年。
當(dāng)需要使用多肽產(chǎn)品時,應(yīng)在開蓋之前將多肽產(chǎn)品升至室溫;對保存于-20℃的產(chǎn)品,該過程需要1h或更長,因包裝大小而異。否則,當(dāng)打開瓶蓋時,水氣進入會導(dǎo)致多肽凝縮而降低其穩(wěn)定性。一旦打開,應(yīng)迅速稱量完畢,并立即密閉以免潮解,親水肽尤其應(yīng)注意。
對序列中含有Cys、Met、Try的易氧化多肽和含有Gln、Asn、Asp的易降解多肽,應(yīng)避免反復(fù)融凍,以免多肽被氧化和降解,因此建議分裝成小包裝保存。需要多少解凍多少,用后棄去,不要保存。
對于暫時不用的多肽,不要以溶液的形式保存(即使在-80°C的條件下)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。