細胞不貼壁生長可能原因及解決方法:
可能原因:
支原體污染。
培養(yǎng)瓶瓶底不干bai凈。
培養(yǎng)液pH 值過堿(NaHCO3 分解)。
消化du液或培養(yǎng)液配制錯誤、過期儲存、儲存不當。
細胞老化(如傳代前細胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性)。
接種細胞起始濃度太低或太高。
解決方法:
縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度.
分離培養(yǎng)物,檢測支原體.清潔支架和培養(yǎng)箱.如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物.
注意刷洗,或換用一次性塑料培養(yǎng)瓶.
使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH 值或充入無菌CO2(將培養(yǎng)液敞口放入培養(yǎng)箱也可).
重新配置消化液或培養(yǎng)液.
啟用新的保種細胞.
調(diào)節(jié)最佳接種細胞濃度.
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