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哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)的瞬時表達是通過轉(zhuǎn)染試劑完成的
哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)能表達天然結(jié)構(gòu)完整的重組蛋白，是廣泛應(yīng)用的人類復(fù)雜糖基化蛋白的表達系統(tǒng)，生物活性接近于天然蛋白質(zhì)，是活性蛋白因子及各類受體蛋白的表達系統(tǒng)，在生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用較廣, 60%以上的的藥用蛋白產(chǎn)品由哺乳動物細胞表達系統(tǒng)獲得。哺乳動物細胞瞬時轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達高活性蛋白，滿足蛋白制備的需求。
哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)是通過脂質(zhì)體或者是PEI的等轉(zhuǎn)染試劑在體外通過和質(zhì)粒形成復(fù)合體， 將質(zhì)粒導(dǎo)入細胞后進行瞬時表達。稱為瞬時表達的原因是因為質(zhì)粒在真核細胞中不能擴增。并且不斷被細胞所降解，這種表達在一定的時間后就會消失。除非質(zhì)粒被整合進入細胞的基因組，通過質(zhì)粒上帶的篩選標(biāo)記，通過篩選得到一株穩(wěn)定表達你的目的蛋白的細胞克隆。但是這種細胞克隆的表達量相比瞬時表達會非常低甚至于檢測不到。
哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)特點：
表達水平高:載體可在哺乳動物細胞中高表達重組蛋白，表達量可高達1-3g/L。
蛋白表達高效穩(wěn)定：高效啟動子控制，穩(wěn)定表達，并可以選擇多種表達系統(tǒng)。
選項：瞬時表達、穩(wěn)定細胞株表達、營養(yǎng)缺陷型細胞株表達、大規(guī)模懸浮細胞表達等。
適合大規(guī)模蛋白表達:常用的哺乳動物表達宿主細胞，使用懸浮細胞培養(yǎng)，可以在一個月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級蛋白。
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