組蛋白提取試劑盒

Total Histone Extraction Kit

產(chǎn)品貨號：12010

產(chǎn)品規(guī)格：50次/100次

產(chǎn)品簡介：

本組蛋白提取試劑盒是由一套完整的優(yōu)化buffer和試劑組成，用于從哺乳動物細胞或組織中提取總組蛋白（H2A、H2B、H3和H4），整個流程可在80min內(nèi)完成，且可保持組蛋白提取物中的翻譯后修飾（PTM）完整性，因此提取物可用于各種翻譯后修飾檢測及應(yīng)用，包括組蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO化和ADP-核糖基化作用研究。

包裝清單：

產(chǎn)品特點：

1.所提取組蛋白可保留所有相關(guān)翻譯后修飾，包括甲基化、乙?；?/span>、磷酸化、泛素化、SUMO化、ADP-核糖基化以及Neddylation等。

2.建議每次從10⁸個細胞/0.1g組織中提取組蛋白樣品。

3.整個實驗流程約需80min。

4.無需超速離心。

操作步驟：

A：組織中提取

1.收集0.1g組織，加入1.0ml Lysis Buffer 1及適量蛋白酶抑制劑（依據(jù)實驗選擇），冰上用組織研磨器或勻漿管研磨。

2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至1.5ml 離心管中，11000rpm 5min，吸棄上清保留沉淀。

3.至步驟2。

B：細胞中提取

1.收集約10⁸個細胞，3000rpm 5min（懸浮細胞直接離心，貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集均可。注意用預(yù)冷PBS清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等），吸棄上清。

2.至步驟1。

步驟1：加1.0ml Lysis Buffer 1及適量蛋白酶抑制劑（依據(jù)實驗選擇），冰上孵育30min（每10min用移液槍吹打一次），4°C 11000rpm離心5min，棄上清。

步驟2：于上述步驟離心管中加入200μl Lysis Buffer 2，置于冰上30min（每10min渦旋一次），4°C 11000rpm離心5min，吸取上清于一新離心管中。

步驟3：加入40μl Balance Buffer于上述步驟離心管中，用移液槍輕輕吹勻。

步驟4：使用BCA定量試劑盒定量。

步驟5：于步驟3離心管中加入2.4μl Adjust Buffer，輕輕吹勻，并應(yīng)用于下游研究。