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如何使用熱板測痛儀評價動物神經(jīng)疼痛模型
一．熱板法實驗
熱板法是鎮(zhèn)痛藥物篩選中常用的一種方法,也是一種能確定區(qū)分中樞神經(jīng)末梢神經(jīng)鎮(zhèn)痛機(jī)理的方法,有較廣的使用范圍,熱板法對動物組織損傷最小,動物可反復(fù)使用,痛反應(yīng)潛伏期較長,便于觀察及測出藥物之間的較小差異,比較出藥物作用的強(qiáng)弱快慢及持續(xù)時間。
二、實驗儀器
智能熱板儀通過測試大鼠和小鼠的疼痛反應(yīng)時間，進(jìn)行快速精確地篩選麻醉型鎮(zhèn)痛藥物。如針對一組大鼠，在服用藥物前，測量該組大鼠在熱盤上舔爪的平均時間，該時間對應(yīng)的是大鼠對熱刺激的反應(yīng)時間，在服用鎮(zhèn)痛或麻醉藥物后，測量該組大鼠在熱盤上舔爪的平均時間，該時間對應(yīng)的是大鼠服用藥物后對熱刺激的反應(yīng)時間，對兩組時間值的比較，評估鎮(zhèn)痛或麻醉藥物對大鼠的效果。該產(chǎn)品適用于大、中專醫(yī)科院校、科研單位進(jìn)行藥理鎮(zhèn)痛實驗教學(xué)及科研工作。
三．實驗方法
1、實驗前預(yù)篩選：以小鼠為例，取若干只小鼠，實驗前24h腹部去毛，將小鼠逐只置于(55.0±0.5)℃熱板儀上，測定記錄小鼠的痛閾值，以舔后足為痛覺指標(biāo)，挑選痛閾值為5~30ｓ的小鼠進(jìn)行實驗。
2、給藥前痛閾值的測定：將篩選出的小鼠逐只置于熱板儀上，各測２次痛閾（間隔10min），取平均值作為小鼠基礎(chǔ)痛閾即給藥前的正常痛閾值。
3、給藥后痛閾值的測定：在服用鎮(zhèn)痛或麻醉藥物后，測量小鼠在熱盤上舔爪的平均時間，該時間對應(yīng)的是小鼠服用藥物后對熱刺激的反應(yīng)，作為給藥后痛閾值。若小鼠在熱板儀上60s內(nèi)仍無痛覺反應(yīng)，立即取出按60s計算并統(tǒng)計給藥前后的痛閾值。
4、痛閾提高的百分率：對兩組時間值的比較，評估鎮(zhèn)痛或麻醉藥物的效果。
計算方式：痛閾提高的百分率＝［（給藥后的痛閾－基礎(chǔ)痛閾）／基礎(chǔ)痛閾］×100％。
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