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            總膽固醇(TC)檢測試劑盒(鄰苯二甲醛比色法)

            來源:上海尚寶生物科技有限公司   2022年05月31日 11:16  

            總膽固醇(TC)檢測試劑盒(鄰苯二甲醛比色法)

            產(chǎn)品貨號: BA1761

             

            產(chǎn)品規(guī)格:60T

             

            產(chǎn)品簡介

            膽固醇(Cholesterol)又稱膽甾醇,是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物,分子式C27H46O。膽固醇廣泛存在于動物體內(nèi),其中腦、神經(jīng)組織,在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也較高??偰懝檀?span style="font-family:Times New Roman">(TC)檢測試劑盒(鄰苯二甲醛比色法)檢測原理是膽固醇及其脂,在強酸存在下與鄰苯二甲醛反應,產(chǎn)生紫紅色化合物,該化合物在550nm波長處有最大吸收峰,分光光度計在550nm處進行比色測定,膽固醇含量在4mg/ml之內(nèi)與吸光度呈良好線性關系。本試劑盒用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的總膽固醇含量定量測定。

             

            產(chǎn)品組成:

            產(chǎn)品名稱

            60T

            保存條件

            試劑(A):膽固醇標準(1mg/ml

            1ml

            4 避光

            試劑(B):TC assay buffer

            100ml

            室溫

            試劑(C):鄰苯二甲醛粉劑

            2×10mg

            4 避光

            試劑(D):鄰苯二甲醛稀釋液

            30ml

            室溫

             

            操作步驟(僅供參考)

            1. 樣本處理:

            ①血清、血漿、腦脊液樣本:從待測樣本中分理出的血清或血漿不應有溶血,直接檢測,如超過線性范圍,用生理鹽水稀釋后檢測。

            ②細胞樣本:

            a、取適量的細胞(一般推薦>106以上),離心,棄上清,留取沉淀。

            b、PBS或生理鹽水清洗1~2次,離心,棄上清,留取沉淀。

            c、加入PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細胞,功率300W,每次3~5s,間隔30s,重復3~5次。

            ③組織樣本:準確稱取適量組織樣本,按質量(g):生理鹽水=的比例,加入生理鹽水,冰浴條件下手動或機械勻漿。離心,取上清待用。

            2. 配制膽固醇標準工作液:按膽固醇標準(1mg/ml)TC assay buffer的比例準確混合,即為膽固醇標準工作液(0.1mg/ml),然后按下表依次稀釋膽固醇標準工作液。

            加入試劑(ml/管號

            0

            1

            2

            3

            4

            膽固醇標準工作液(0.1mg/ml

            0

            0.06

            0.12

            0.18

            0.24

            TC assay bufer

            0.24

            0.18

            0.12

            0.06

            0

            總膽固醇濃度(mg/ml

            0

            1

            2

            3

            4

            3. 配制鄰苯二甲醛工作液:取1(10mg)鄰苯二甲醛粉劑的準確加入鄰苯二甲醛稀釋液1,充分混勻,即為鄰苯二甲醛工作液。4℃避光保存,2周有效。?

            4. 配制強酸工作液:取適量的TC?assay?buffer和濃硫酸等量混合,即為強酸工作液。注意:本試劑盒不提供濃硫酸,需用戶自備。二者混合時,一定小心操作,以免誤傷自己。配制好的強酸工作液工作液中的硫酸含量應準確,否則有可能影響顯色效果。?

            5. 分光光度計膽固醇測定操作:?

            ①按下表依次加入試劑:

            加入試劑(ml

            空白管

            標準管

            待測管

            蒸餾水

            0.006



            系列膽固醇標準工作液


            0.006


            待測血清或其他樣本



            0.006

            TC assay buffer

            024

            0.24

            0.24

            鄰苯二甲醛工作液

            0.12

            0.12

            0.12

            強酸工作液

            2.4

            2.4

            2.4

            ②充分混勻,?靜置。?

            ③以分光光度計,1cm比色杯測定550m吸光度,以空白管調零,讀取標準管和各待測管的吸光度。?

            ?

            計算:?以吸光度為縱坐標,以膽固醇濃度為橫坐標,作標準曲線。對照標準曲線即知待測樣本的濃度。

             

            注意事項:

            1. 上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。?

            2. 本法可直接用于檢測腦脊液中的TC含量,也可直接檢測尿液中的TC含量。?

            3. 待測樣本如不能及時測定,應置于2~8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。?

            4. 如果樣本TC濃度過高,結果可能呈假性降低,應用生理鹽水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數(shù)。

             

            有效期:6個月有效。


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