轉染J774.1(小鼠單核巨噬細胞)結果
siRNA轉染步驟:
1、合成siRNA時請帶熒光,若siRNA不帶熒光、請使用熒光對照,方便查看轉染效率
2、siRNA濃度:20uM/L
3、siRNA和轉染試劑復合物制備:siRNA 8ul和轉染試劑8ul,吹打混勻室溫靜置15分鐘,無需另外加入任何試劑稀釋
4、細胞轉染前狀態(tài):拍明場細胞照片留存
5、貼壁細胞鋪板:6孔板*培養(yǎng)基2ml、培養(yǎng)基中不加雙抗,細胞密度:60%左右(不同細胞,按48小時生長到90%,往前推算細胞鋪板密度)
6、轉染:將復合物加入輕搖混勻、培養(yǎng)箱培養(yǎng)
7、換液:轉染24小時后培養(yǎng)基換液
8、轉染效率:轉染48小時后拍熒光照片,查看轉染效率
9、轉染后細胞狀態(tài):拍明場細胞狀態(tài)照片
10、檢測:總計轉染48小時后提取RNA或蛋白檢測
上海轉染生物科技有限公司是服務于高校和科研院所生命科學研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、生物制品生產、基因和細胞治療等領域高科技生物技術企業(yè)。提供的第三代高分子、細胞內可代謝的轉染試劑,解決了難轉染細胞轉染效率低、脂質體轉染毒性大致細胞死亡多、需要無血清環(huán)境的這些問題,比如:RAW264.7、THP-1、精原干細胞、IPS細胞、BMDM、MT-4人淋巴T細胞、SW480、A549、U87細胞等;提供的活體動物可代謝體內轉染試劑,可轉染長片段質粒DNA至體內 可通過靜脈注射或體內局部組織注射的簡單方式完成轉染過程; 提供的無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,培養(yǎng)間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物制品生產公司提供無血清的細胞規(guī)模生產支持;
美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的第三代高分子轉染試劑,此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產的主要關鍵技術之一。
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