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            蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測程序

            來源:上海研生實業(yè)有限公司   2022年06月08日 14:28  

            蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測程序:


            1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。


            2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。


            3.  每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。


            4.  洗板:同前。


            5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。


            6.  洗板:同前。


            7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。


            8.  每孔加入100ul 終止液混勻。


            9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。


            結(jié)果計算與判斷


            1.  所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計算。


            2.  以標(biāo)準(zhǔn)品4000 、 20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 0  pg /ml 為橫坐標(biāo), OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。


            3.  根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) TIMP-1 含量 即可 。


            試劑盒性能


               1.    靈敏度 : 最小的TIMP-1  檢測濃度小于 31p g/ml。


            2.  特異性: 可同時檢測重組或天然的小鼠 TIMP-1 。 不與 小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。


            3.  重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。


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