蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

結(jié)果計算與判斷

1.  所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計算。

2.  以標(biāo)準(zhǔn)品4000 、 20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 0  pg /ml 為橫坐標(biāo)， OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.  根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) TIMP-1 含量 即可 。

試劑盒性能

   1.    靈敏度 ： 最小的TIMP-1  檢測濃度小于 31p g/ml。

2.  特異性： 可同時檢測重組或天然的小鼠 TIMP-1 。 不與 小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。

3.  重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。