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色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對糖和有機(jī)酸分析色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效；對于同系物分析，只要500即可；對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
糖和有機(jī)酸分析色譜柱是高效液相分離系統(tǒng)的中重要的環(huán)節(jié)，根據(jù)極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN，-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱；反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還C8，C4，C2和苯基柱等。
今天要與大家分享的是糖和有機(jī)酸分析色譜柱的操作方法，希望能夠幫助到大家：
1、在條件允許情況下，在使用前對新色譜柱按照說明書方法進(jìn)行柱效測試，以確保其正常使用。
2、所有產(chǎn)品使用溫度應(yīng)低于60℃。
3、將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑，為達(dá)到較好峰形，需要降低進(jìn)樣量。
4、所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制；如果使用了前日配制的流動相，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌。流動相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。
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