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成像流式細(xì)胞儀是將待測細(xì)胞或微粒進(jìn)行熒光染色后制成懸液標(biāo)本,在一定氣體壓力下將待測樣品壓入流動室,用不含細(xì)胞或微粒的緩沖液(又稱鞘液)在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管入口方向與待測細(xì)胞或微粒流成一定角度,使鞘液包繞著細(xì)胞或微粒高速流動,形成一個圓形的流束(即鞘流),待測細(xì)胞在鞘液的包裹下單行排列,依次通過流式細(xì)胞儀的檢測區(qū)域,經(jīng)激發(fā)光激發(fā)后產(chǎn)生熒光信號。
成像流式細(xì)胞儀工作過程：
開始使用流式細(xì)胞儀，第一步是準(zhǔn)備要分析的樣品。從細(xì)胞培養(yǎng)物，血液或分解的組織中獲得的細(xì)胞應(yīng)制成懸浮液。將該細(xì)胞懸浮液分成數(shù)個試管進(jìn)行染色，保留未染色細(xì)胞作為對照。通過添加標(biāo)記有熒光探針的抗體或染色細(xì)胞成分的染料對其他細(xì)胞樣品染色。分析細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)時(shí)，首先必須將細(xì)胞固定（使用福爾馬林緩沖液）并進(jìn)行透化（使用透化劑），以使抗體和染料進(jìn)入細(xì)胞。細(xì)胞與抗體或染料孵育后，將細(xì)胞在緩沖液中洗滌，然后重懸在基于鹽的緩沖液中進(jìn)行分析。然后將準(zhǔn)備好的樣品引入流式細(xì)胞儀。
成像流式細(xì)胞儀有三個主要組成部分：液流系統(tǒng)，光學(xué)系統(tǒng)和電子系統(tǒng)。在流式細(xì)胞儀的中心部分，流通池中樣品材料遇到激發(fā)光并散射光，隨后該光被檢測系統(tǒng)讀取和記錄。既具備流式細(xì)胞術(shù)的速度、靈敏度和分型能力，也具備顯微鏡的清晰圖像和有效洞察力功能。
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