植物組織果糖含量檢測試劑盒（微量法）

產品貨號：BA1514

產品規(guī)格：100管/96樣

產品簡介：

果糖是一種最為常見的己酮糖，是葡萄糖的同分異構體，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與 葡萄糖結合生成蔗糖。果糖是最甜的單糖，廣泛應用于食品、醫(yī)藥、保健品生產中。

在酸性條件下果糖與間苯二酚反應，生成有色物質，在480nm下有特征吸收峰。

技術指標： 

檢出限：0.065mg/mL

線性范圍：0.5-35mg/mL

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。

產品內容：

溶液的配制：

試劑一：10mg果糖，臨用前加1mL蒸餾水溶解，再用蒸餾水稀釋為4mg/mL的果糖標準液。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻） 

稱取約0.05g樣本，常溫研碎；加入0.5mL提取液，適當研磨后快速轉移到有蓋離心管中；置于80℃水浴鍋中 10min（蓋緊，以防止水分散失），振蕩3~5次，冷卻后，4000g，常溫離心10min，取上清；加入少量（約2mg） 試劑四，80℃脫色30min（蓋緊，以防止水分散失）；再加入0.5mL提取液，4000g，常溫離心10min，取上清液測定。

二、測定步驟 

1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至480nm，蒸餾水調零。

2. 樣本測定（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：

混勻，80℃水浴反應10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中測定 480nm處光吸收值，記為A空白管、A標準管、A測定管，并計算ΔA測定=A 測定管-A空白管、ΔA標準=A標準管-A空白管。

二、果糖含量計算： 

1. 按樣本蛋白濃度計算

果糖含量（mg/mg prot）=C標×ΔA測定÷ΔA標準×V樣總÷（Cpr×V樣總）=4×ΔA測定÷ΔA標準÷Cpr

2. 按樣本質量計算

果糖含量（mg/g 質量）=C標×ΔA測定÷ΔA標準×V樣總÷W=4×ΔA測定÷ΔA標準÷W

C標準管：標準管濃度，4mg/mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣 本質量，g。

注意事項： 

如果樣本吸光值大于1.1，建議將樣本用提取液稀釋后進行測定