植物組織果糖(FT)含量檢測(cè)試劑盒(可見(jiàn)分光光度法)
植物組織果糖(FT)含量檢測(cè)試劑盒(可見(jiàn)分光光度法)
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
產(chǎn)品貨號(hào):BA1513
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:5mg/mL標(biāo)準(zhǔn)液1mL×1支,4℃保存;
試劑二:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體10mL×1瓶, 4℃保存;
試劑四:粉劑0.5g×1瓶,常溫保存。
產(chǎn)品說(shuō)明:
果糖是一種常見(jiàn)的己酮糖,是葡萄糖的同分異構(gòu)體,以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中,能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。果糖是最甜的單糖,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品生產(chǎn)中。
在酸性條件下果糖與間苯二酚反應(yīng),生成有色物質(zhì),在480nm下有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、蒸餾水。
操作步驟:
一、果糖提?。?/span>
稱取約0.1g樣本,常溫研碎;加入1mL提取液,適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中;置于80℃水浴鍋中 10min(蓋緊,以防止水分散失),振蕩3~5次,冷卻后,4000g,常溫離心10min,取上清;加入少量(約 2mg)試劑四,80℃脫色 30min(蓋緊,以防止水分散失);再加入1mL提取液,4000g,常溫離心10min,取上清液測(cè)定。
二、測(cè)定操作表(在 1.5mL EP 管中依次加入下列試劑):
1、可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至480nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測(cè)定
試劑名稱(uL) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
樣本 | 100 | ||
試劑一 | 100 | ||
蒸餾水 | 100 | - | |
試劑二 | 700 | 700 | 700 |
試劑三 | 200 | 200 | 200 |
混勻,80℃水浴內(nèi)反應(yīng)10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后測(cè)定480nm處光吸收值,記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A測(cè)定管,并計(jì)算△A測(cè)定=A測(cè)定管-A空白管、△A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。
果糖含量計(jì)算:
1、按蛋白濃度計(jì)算
果糖含量(mg/mg prot)= C標(biāo)×△A測(cè)定
÷△A標(biāo)準(zhǔn)×V樣總÷(Cpr×V樣總)
=5×△A測(cè)定÷△A標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr
2、按樣本鮮重計(jì)算
果糖含量(mg/g 鮮重)= C標(biāo)×△A測(cè)定÷△A標(biāo)準(zhǔn)×V樣總÷W =10× △A測(cè)定÷△A標(biāo)準(zhǔn)÷W
C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)品濃度,5mg/mL;W:樣品鮮重,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;V樣總:提取液體積,2mL。
注:如果測(cè)定管的OD值大于0.6,請(qǐng)用提取液稀釋樣品。
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