植物總酚(TP)檢測試劑盒(微板法)
產(chǎn)品貨號:BA1786
產(chǎn)品規(guī)格:100T
產(chǎn)品簡介:
植物組織或果實中存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質(zhì),這些物質(zhì)與果實等樣品衰老過程密切相關(guān),對其加工性能、存儲、營養(yǎng)價值等都有重要影響。植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
植物總酚檢測試劑盒(微板法)檢測原理是總酚(Total Phenol)溶于有機溶劑,以有機溶劑粗提總酚,根據(jù)提取液的吸收光譜特性,可利用分光光度計在特定波長(280nm)處測定其吸光度,通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,計算出總酚含量,該試劑盒主要用于植物組織或果實中總酚的提取以及定量檢測總酚含量。該試盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑(A): 總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml) | 1.5mL | 4℃ 避光 |
試劑(B): TP Assay Buffer | 2×500mL | 室溫 |
需自備的儀器和用品:
實驗材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織,研缽或勻漿器,離心管,離心機,濾紙或紗布,96孔板,酶標(biāo)儀。
操作步驟(僅供參考):
1. 總酚提?。?/span>
①取果實或其他植物組織,洗凈,擦干,稱取剪碎的新鮮樣品0.25g,置于4℃預(yù)冷的研缽或勻漿器。
②加入4℃預(yù)冷的2~3ml TP Assay Buffer,充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入10ml離心管,用TP Assay Buffer沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管,補加TP Assay Buffer至8ml。
③4℃避光靜置20min,期間搖動2~3次,然后過濾至離心管,也可用離心機8000r/min離心3min,濾液(上清液)即為總酚粗提液。
2. 稀釋總酚標(biāo)準(zhǔn)溶液:取適量的總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按下表進行稀釋:
加入物(μl) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml) | 30 | 60 | 90 | 120 | 150 | 300 |
蒸餾水 | 270 | 240 | 210 | 180 | 150 | 0 |
總酚濃度(mg/ml) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 1 |
3. TP加樣:取96孔板,按照下表設(shè)置空白孔、對照孔、測定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡,小心混勻。如果樣品中的總酚濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置2平行孔,求平均值。
加入物(μl) | 空白孔 | 標(biāo)準(zhǔn)孔 | 測定孔 |
TP Assay Buffer 200 | 200 | - | - |
系列總酚標(biāo)準(zhǔn)(1~6 號孔) | - | 200 | - |
總酚粗提液 | - | - | 200 |
4. TP測定:以空白調(diào)零,以酶標(biāo)儀測定系列標(biāo)準(zhǔn)孔、測定孔在280nm處吸光度。
計算:
以1~6號孔系列總酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)為橫坐標(biāo),以對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進而計算出各測定孔總酚含量(mg/ml)。
組織樣品的總酚(mg/g)={C×VT}/(W×V1)
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測定管總酚含量(mg/ml)
VT=總酚粗提液總體積(ml)=8
V1=加樣時所用總酚粗提液的體積(ml)=0.2
W=樣品鮮重(g)
液體樣品的總酚(mg/ml)=C×N/V
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測定管總酚含量(mg/ml)
V=加樣時所用總酚粗提液的體積(ml)=0.2
N=稀釋倍數(shù)
注意事項:
1. 為了避免總酚見光分解,操作時應(yīng)盡量避光,研磨或勻漿時應(yīng)盡量縮短時間。
2. 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)總酚含量適當(dāng)調(diào)整。
3. TP Assay Buffer應(yīng)密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。
4. 如果沒有酶標(biāo)儀,也可以使用分光光度計測定。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。常溫運輸,4℃保存。
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