植物總酚(TP)檢測(cè)試劑盒(比色法)
產(chǎn)品貨號(hào):BA1787
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
植物組織或果實(shí)中存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質(zhì),這些物質(zhì)與果實(shí)等樣品衰老過(guò)程密切相關(guān),對(duì)其加工性能、存儲(chǔ)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值等都有重要影響。植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
植物總酚檢測(cè)試劑盒(比色法)檢測(cè)原理是總酚(Total Phenol)溶于有機(jī)溶劑,以有機(jī)溶劑粗提總酚,根據(jù)提取液的吸收光譜特性,可利用分光光度計(jì)在特定波長(zhǎng)(280nm)處測(cè)定其吸光度,通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,計(jì)算出總酚含量,該試劑盒主要用于植物組織或果實(shí)中總酚的提取以及定量檢測(cè)總酚含量。該試盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品組成 | 50T | 保存條件 |
試劑(A): 總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml) | 5ml | 4℃,避光 |
試劑(B): TP Assay Buffer | 500ml | 室溫 |
需自備的儀器和用品:
1. 實(shí)驗(yàn)材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實(shí)或其他植物組織
2. 研缽或勻漿器
3. 離心管、離心機(jī)
4. 濾紙或紗布
5. 比色杯
6. 分光光度計(jì)
操作步驟(僅供參考):
1. 總酚提取:
①取果實(shí)或其他植物組織,洗凈,擦干,稱取剪碎的新鮮樣品0.25g,置于4℃預(yù)冷的研缽或勻漿器。
②加入4℃預(yù)冷的2~3ml TP Assay Buffer,充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入10ml離心管,用TP Assay Buffer沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管,補(bǔ)加TP Assay Buffer至8ml。
③4℃避光靜置20min,期間搖動(dòng)2~3次,然后過(guò)濾至離心管中,也可用離心機(jī)8000r/min離心3min,濾液(上清液)濾液即為總酚粗提液。
2. 稀釋總酚標(biāo)準(zhǔn)溶液:取適量的總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按下表進(jìn)行稀釋:
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 1 |
蒸餾水 | 0.9 | 0.8 | 0.7 | 0.6 | 0.5 | 0 |
總酚濃度(mg/ml) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 1 |
3. TP加樣:按照下表設(shè)置空白管、對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡,小心混勻。如果樣品中的總酚濃度過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行管,求平均值。
加入物(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
TP Assay Buffer | 1 | - | - |
系列總酚標(biāo)準(zhǔn)(1~6號(hào)管) | - | 1 | - |
總酚粗提液 | - | - | 1 |
注意:如用較大的比色杯,可相應(yīng)增加試劑量,其后計(jì)算公式中V1 =加樣時(shí)所用總酚粗提液的體積(ml)應(yīng)相應(yīng)發(fā)生變化,不再是1。
4. TP測(cè)定:以空白調(diào)零,比色杯光徑1cm,以分光光度計(jì)測(cè)定系列標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管在280nm處吸光度。
計(jì)算:
以1~6號(hào)管系列總酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)為橫坐標(biāo),以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)而計(jì)算出各測(cè)定管總酚含量(mg/ml)。
組織樣品的總酚(mg/g)={C×V T }/(W×V 1 )
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管總酚含量(mg/ml)
V T =總酚粗提液總體積(ml)=8
V 1 =加樣時(shí)所用總酚粗提液的體積(ml)=1
W=樣品鮮重(g)
液體樣品的總酚(mg/ml)=C×N/V
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管總酚含量(mg/ml)
V=加樣時(shí)所用總酚粗提液的體積(ml)=1
N=稀釋倍數(shù)
注意事項(xiàng):
1. 為了避免總酚見光分解,操作時(shí)應(yīng)盡量避光,研磨或勻漿時(shí)應(yīng)盡量縮短時(shí)間。
2. 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)總酚含量適當(dāng)調(diào)整。
3. TP Assay Buffer應(yīng)密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。
4. 如果沒有分光光度計(jì),也可以使用酶標(biāo)儀測(cè)定。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:12個(gè)月有效。常溫運(yùn)輸,4℃保存。
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