如何正確使用反相色譜柱？

來(lái)源：東曹（上海）生物科技有限公司 2022年11月14日 09:28

根據(jù)流動(dòng)相和固定相相對(duì)極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動(dòng)相極性大于固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。

反相色譜柱是一種用于分離分析各種物質(zhì)的高效液相色譜分離柱。反相色譜柱具有高效、靈敏和選擇性好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)藥、食品等工業(yè)領(lǐng)域以及環(huán)保監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。

使用方法：

1.先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再依次以相同的流速相同的用量用氯、異丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）沖柱子；

2.以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉（LUNA）水溶液沖柱子（注意pH值切不可超過(guò)11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱體積）沖洗，再換成流動(dòng)相；

3.配制流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)各組分分別量取，比例較小的組分要精密量取，需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1；

4.反相條件下使用時(shí)，要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。理想的pH范圍在pH3.0-7.0；

5.如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動(dòng)相之前，先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過(guò)渡，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。

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