油紅O異丙醇飽和溶液
產(chǎn)品貨號(hào): R23135
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇、等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲(chǔ)存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲(chǔ)存能量的方式之一,在氧化時(shí)釋放出能量。在正常情況下,除脂肪細(xì)胞外,其他細(xì)胞在光學(xué)顯微鏡下幾乎看不到脂滴,如果細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴即為脂肪變性,常見于肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腎曲管上皮細(xì)胞等。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,較易不甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀,不磷脂結(jié)合力稍差。其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。
油紅O染色主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著,常發(fā)生于肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質(zhì)。標(biāo)本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%福爾馬林)、也不采用石蠟切片,需用冰凍切片或碳蠟切片。脂肪的陽性染色結(jié)果呈橘黃至紅色,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。
產(chǎn)品組成:
名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
油紅O異丙醇飽和溶液 | 100ml | 室溫 |
自備材料:
1. 60%異丙醇
2. 蒸餾水
3. Mayer蘇木素染色液
4. 1%鹽酸溶液
5. 甘油明膠或阿拉伯糖膠
操作步驟(僅供參考):
1. 按油紅O異丙醇飽和溶液:蒸餾水=3:2比例配制油紅O染色工作液。
2. 冰凍切片厚度6~10μm,不固定或 10%福爾馬林固定10min后水洗。
3. 切片入蒸餾水中稍沖洗。
4. 切片入60%異丙醇浸洗20~30s。
5. 切片入油紅O染色工作液(加蓋),密閉染色10~15min。
6. 分色: 入60%異丙醇內(nèi)稍洗以便去除染液。
7. 入蒸餾水中稍微清洗。
8. 入Mayer蘇木素染色液,復(fù)染核1~2min。
9. (可選)1%鹽酸溶液稍微分化一下。
10. (可選)自來水漂洗10min或稀鋰溶液促藍(lán)。
11. 入蒸餾水稍微清洗。
12. 用濾紙吸干周圍水分。
13. 甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。
染色結(jié)果:
中性脂肪 橙紅色或橘紅色
細(xì)胞核 藍(lán)色
注意事項(xiàng):
1. 油紅O染色工作液不夠穩(wěn)定,易產(chǎn)生沉淀,不宜提前配制。
2. 如果60%異丙醇不易獲得,亦可采用70%乙醇。
3. 由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑,顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理,而通過冰凍切片染色來顯示。
4. 作為脂肪染色的冰凍切片不可太薄,過薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。
5. Mayer蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過長(zhǎng)。
6. 染色結(jié)果不能長(zhǎng)期保存,應(yīng)盡快觀察及照相。
7. 甘油明膠封固的樣本,保存時(shí)間不長(zhǎng)。如需長(zhǎng)期保存,可以在蓋玻片不載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉。
有效期:6個(gè)月有效。
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