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His標簽抗體是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽，專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小，并且較容易分離和純化，His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優(yōu)勢， 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標簽融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位，以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。然而，目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多， 且價格也十分昂貴。
如何選擇合適的His標簽抗體？
我們在選擇His抗體時，主要根據(jù)自己的需要，特別是實驗應(yīng)用上的需要。其中需要考慮的因素包括了，His抗體的應(yīng)用檢測類型、His抗體的克隆性及制備來源等。比如該His抗體是否能用于Western Bloting的檢測？是否可以用于免疫熒光IF實驗？我是否需要特異性更好的單克隆His標簽抗體？我是否需要考慮下是選擇小鼠來源的還是兔來源的His抗體？
一般來說，應(yīng)用類型越多，在使用過程中的選擇余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外，抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面，也即相當于實際應(yīng)用時的稀釋比率。一個效價高的100μl His抗體（假如其WB檢測的稀釋比率是1:5，000，最終使用液相當于500ml），要比效價低的1ml的His抗體（假如WB檢測的稀釋比率是 1:200，最終使用液相當于2ml）性價比更高。因此在選擇His標簽抗體的時候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價，即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。
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