硝酸鹽還原試驗(yàn)試劑(Griess試劑)

產(chǎn)品貨號：R23487

產(chǎn)品規(guī)格：2×10ml/2×50ml

產(chǎn)品簡介：

微生物的呼吸作用主要分為有氧呼吸和無氧呼吸，氧化酶試驗(yàn)、過氧化氫酶試驗(yàn)與硝酸鹽還原試驗(yàn)為有氧呼吸或無氧呼吸的重要環(huán)節(jié)，在細(xì)菌鑒定中起著重要作用。

硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過程：一是在合成過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其他含氮化合物；二是在分解代謝過程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體，能使硝酸鹽還原的細(xì)菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產(chǎn)物。硝酸鹽還原過程可因細(xì)菌不同而異。有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希氏菌等；有的細(xì)菌可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨；有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如假單胞菌和沙雷菌屬等；有的細(xì)菌還可以將其還原產(chǎn)物在合成性代謝中全利用。

硝酸鹽還原試驗(yàn)試劑又稱作Griess試劑、亞硝酸鹽試劑等，主要由對氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液組成，主要用于鑒別腸桿菌、假單胞菌等。大腸埃希氏菌等細(xì)菌僅能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，在乙酸作用下，亞硝酸鹽與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者與α-萘胺結(jié)合生成紫紅色~紅色產(chǎn)物；假單胞菌、沙雷菌等細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮或氧化氮，該作用被稱為脫硝化或脫氮化作用，產(chǎn)生氣泡，但無紅色出現(xiàn)。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. 硝酸鹽培養(yǎng)基

2. 恒溫培養(yǎng)箱、試管、酒精燈

3. 接種環(huán)、接種箱、精密天平(精度值0.1mg)

操作步驟(僅供參考)：

1. 被檢細(xì)菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基，35℃培養(yǎng)1～4天。

2. 取適量的對氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液等量混合后即為硝酸鹽還原試驗(yàn)試劑。

3. 取0.1ml硝酸鹽還原試驗(yàn)試劑加入培養(yǎng)基中，立即觀察結(jié)果。

4. 若加入硝酸鹽還原試驗(yàn)試劑不出現(xiàn)紅色，需向試管中加入少許鋅粒(2~8?；?/span>5~20mg)，搖晃2~5min，使充分反應(yīng)，如出現(xiàn)紅色，則表示培養(yǎng)基中仍存在硝酸鹽；若仍不產(chǎn)生紅色，則表示硝酸鹽已被還原為氨或氮，可在培養(yǎng)基內(nèi)加入1支小倒管，若有氣泡產(chǎn)生，表示有氮?dú)馍?，可排除假陰性?/span>

 染色結(jié)果：

注意：加入試劑無顏色反應(yīng)，可能原因：1、硝酸鹽沒有被還原，實(shí)驗(yàn)確為陰性；2、硝酸鹽被還原為氨和氮等其他物質(zhì)，進(jìn)而導(dǎo)致假陰性。這時(shí)可加入少許鋅粉，如出現(xiàn)紅色則說明實(shí)驗(yàn)確為陰性，如果未出現(xiàn)紅色則說明實(shí)驗(yàn)為假陰性。 

注意事項(xiàng):

1. 取細(xì)菌培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)注意自我防護(hù)。

2. 待檢細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間也會影響染色，陽性菌培養(yǎng)時(shí)間過長或已死亡或細(xì)菌溶解，都常呈陰性反應(yīng)。

3. 某些厭氧菌(韋榮球菌)亦呈陽性反應(yīng)。

4. 必須在加入試劑之后立即判定結(jié)果，否則因顏色迅速褪色而造成判定困難，如銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌等。

5. 對氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液含有乙酸，有刺激性氣味，應(yīng)避免吸入。

6. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：12個(gè)月有效。