生物芯片技術(shù)是20世紀90年代初伴隨著人類基因組計劃的實施而產(chǎn)生的一門新技術(shù),已成為、大規(guī)模獲取相關(guān)信息的重要手段。它主要通過微加工技術(shù)和微電子技術(shù),將成千上萬與生命相關(guān)的信息集成在一塊厘米見方的硅、玻璃、塑料等材料制成的芯片上,以達到對基因、配體、細胞、蛋白質(zhì)、抗原以及其他生物組分準確、快速地分析和檢測。目前,生物芯片技術(shù)被廣泛研究應用于基因序列分析、疾病診斷、藥物研究、微生物檢測、農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)、食品、環(huán)境保護和檢測等領域,現(xiàn)簡單介紹其在藥物分析中的應用。
生物芯片在藥物分析中的應用主要是指采用毛細管電泳芯片/質(zhì)譜系統(tǒng)對化合物庫、血樣和尿樣中的藥物進行分析鑒定,具有快速(30S)、準確、微量等優(yōu)點。毛細管電泳芯片/質(zhì)譜系統(tǒng)是指將毛細管電泳芯片和質(zhì)譜聯(lián)用的一套裝置。毛細管電泳芯片進行樣品的分離,而與芯片聯(lián)用的質(zhì)譜則有選擇性的對分離成分進行檢測。美國康奈爾大學的wachs等發(fā)明了一種微型化的離子噴霧裝置。這種裝置適合于與基因芯片的分離裝置、多孔板或帶有待測樣品殘渣的表面聯(lián)用。這種裝置有兩種版本,一種稱為微型噴霧器,主要與毛細管電泳芯片聯(lián)用;另一種稱為小型噴霧器,它帶有伸長的吸樣毛細管,可以插入多孔板孔的底部,所以適合與多孔板聯(lián)用。這種裝置可以幫助人們對芯片分離所得樣品或多孔板中樣品進行質(zhì)譜檢測。來自康奈爾大學同一個實驗室的Deng等將玻璃制成的毛細管電泳芯片與他們自己設計的微型離子噴霧裝置連接,使用PE公司的質(zhì)譜系統(tǒng)做檢測,對多種藥物的標準品和血漿樣品進行了分析檢測。實驗結(jié)果證明,使用毛細管電泳芯片/質(zhì)譜系統(tǒng)對小分子化合物進行快速(30s)檢測是可行的。這套裝置可以用來對合成的化合物庫和人血漿中重要成分進行分析檢測。Ramseier等用芯片毛細管電泳和硅膠毛細管電泳檢測尿中ben丙胺及其類似物,實驗結(jié)果顯示芯片毛細管電泳的方法具有更快的分離速度和更高的分離效率。Chiem等則用毛細管電泳芯片檢測了血清中的茶堿。
生物芯片在中藥鑒定中的應用主要是對植物細胞進行基因測序。因為任何一個生物個體,不受發(fā)育階段影響,其不同組織器官部位以至細胞都具備相同的遺傳信息,不同生物的遺傳信息是不相同的。因此,利用生物芯片可以準確無誤的確定中藥的來源。已有學者開始對地道與非地道藥材如貝母、金銀花等的DNA序列進行研究,分離特異核苷酸序列作為探針并制備DNA芯片,進行鑒定。在同一時間內(nèi)能分析大量基因,所以可用于尋找新的有效化學成分、提高藥物鑒定能力和效率,還可用于中藥復方組成的鑒定。采用基因芯片技術(shù)鑒定中藥的過程是:①應用分子生物學技術(shù)找出待鑒定中藥的特點寡核苷酸序列。(以此寡核苷酸序列作為探針裝配到芯片上。(檢測樣品的準備(DNA提取、擴增和熒光標記)@檢測樣品與芯片上探針進行雜交:熒光檢測及結(jié)果分析。
用生物芯片技術(shù)還能對中藥的有效成分進行鑒定,分子生物學認為中藥有效成分含量受產(chǎn)地、氣候、環(huán)境的影響是通過基因表達起作用的,基因表達的變化與中藥特定階段成份特征根本相關(guān)。因此收集標準中藥材、提取DNA、建立CDNA文庫,克隆各基因片段、組成DNA微陣列基因芯片,用芯片與標準藥材RNA雜交,其結(jié)果可結(jié)合計算機技術(shù)建立生藥標準品數(shù)據(jù)庫。用于快速篩選高品質(zhì)藥材,井建立生藥質(zhì)量標準。同理,此類基因芯片可以遴選出有效成份組成相近的某稀有或瀕危物種的替代者,開發(fā)新藥資源。這是開發(fā)中草藥使之更為科學化,打開市場的優(yōu)選方法。
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